Primer extension 방법과 β-galactosidase assay에 의한 Bacillus subtilis SecY 단백질의 promoter 지역과 활성 분석 = Analysis of the promoter region and activity of Bacillus subtilis SecY by primer extension and β-galactosidase assay
저자
서주원 (명지대학교 이과대학 생명과학과)
발행기관
명지대학교 자연과학연구소(THE NATURAL SCIENCE RESEARCH INSTITUTE MYONGJI UNIVERSITY)
학술지명
권호사항
발행연도
1996
작성언어
Korean
KDC
404
자료형태
학술저널
수록면
92-98(7쪽)
제공처
소장기관
Bacillus subtilis의 단백질 분비 기작은 이 균주를 단백질 분비 숙주 균주로 이용하고자 하는 실용적 목적과 함께 연구의 관심의 대상이 되어왔다. 최근 본 연구자는 그람 양성균인 B. subtilis에서 대장균의 단백질 분비에 중요한 역할을 담당하고 있는 것으로 알려진 secY 유전자에 상응한 유전자를 분리해 내는데 성공하였다. B. subtilis secY는 대장균의 secY 유전자와 상응한 spc operon내에 위치하고 아미노산 배열이 잘 보존되어 있었으며, 이와같은 유사성들은 그람 양성균과 음성균에서 단백질 분비기작이 비슷하다는 것을 시사해주고 있다.
pDH32 promoter probe vector를 이용한 실험에서 B. subtilis의 SecY 단백질 발현에 관여할 것으로 보이는 secY 유전자 앞에 위치한 promoter를 발견하여 세포성장과 이 promoter에서의 발현을 검색하였다. secY 유전자 앞에 위치한 promoter에서의 전사는 세포성장중 지수기로 접어들어 두시간대에(T₂) 그 활성이 가장 왕성하였다.
T₂에서 RNA를 추출하고 promoter의 위치를 S1 mapping과 primer extention 방법으로
검색한 결과 이 promoter는 secY 유전자 앞에 있는 L15(ribosomal protein) 유전자 (rplO) 앞에 위치하여 세 개의 minor protein으로 구성되어 있고, promoter의 DNA 염기서열은 (-10 and -35 region) major sigma factor의 consensus sequence 보다는 편모 구성 및 chemotaxis에 관여하는 유전자들을 전시하는 것으로 알려진 sigma-D와 Escherichia coli sigma-F의 consensus sequence와 상당한 유사성을 보여주고 있었다. 이는 Chemotaxis와 단백질 분비가 서로 연관되어 있다는 사실을 보여주는 새로운 발견으로 앞으로 이 방면에 대한 연구에 크게 기여하리라 생각된다.
The protein secretion system of the gram positive microorganism Bacillus subtilis has been a matter of interest because of its practical use. Recently, I isolated the gene for B. subtilis sec Y as the corresponding position of Escherichia coli sec Y in the spc operon. The high conservation of SecY in the gram-positive B. subtilis and gram-negative E. coli suggests that a similar mechanism of protein translocation across the membrane exists in both organism.
We found the promoter for the secY gene expression using the pDH32 promoter probe vector and as sayed the promoter activity in exponential phase as well as in stationary phase. SecY was expressed maximally at T2 in stationary phase. The total RNA at T2 cells was isolated and used for S1 mapping and primer extension experiments to determine the transcription initiation site. Three minor promoters located in front of the gene for L15(ribosomal protein) wee indentified. The DNA sequences of the -10 and -35 regions of the promoter were significantly resembled the consensus sequences of the B. subtilis sigma D and Escherichia coli sigma F which are assential for the transcription of the genes for flagella formation and chemotaxis, These new findings suggested very interesting and important facts that chemotaxis and protein secretion are related in B. subtilis and will promote the research in this field.
서지정보 내보내기(Export)
닫기소장기관 정보
닫기권호소장정보
닫기오류접수
닫기오류 접수 확인
닫기음성서비스 신청
닫기음성서비스 신청 확인
닫기이용약관
닫기학술연구정보서비스 이용약관 (2017년 1월 1일 ~ 현재 적용)
학술연구정보서비스(이하 RISS)는 정보주체의 자유와 권리 보호를 위해 「개인정보 보호법」 및 관계 법령이 정한 바를 준수하여, 적법하게 개인정보를 처리하고 안전하게 관리하고 있습니다. 이에 「개인정보 보호법」 제30조에 따라 정보주체에게 개인정보 처리에 관한 절차 및 기준을 안내하고, 이와 관련한 고충을 신속하고 원활하게 처리할 수 있도록 하기 위하여 다음과 같이 개인정보 처리방침을 수립·공개합니다.
주요 개인정보 처리 표시(라벨링)
목 차
3년
또는 회원탈퇴시까지5년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한3년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한2년
이상(개인정보보호위원회 : 개인정보의 안전성 확보조치 기준)개인정보파일의 명칭 | 운영근거 / 처리목적 | 개인정보파일에 기록되는 개인정보의 항목 | 보유기간 | |
---|---|---|---|---|
학술연구정보서비스 이용자 가입정보 파일 | 한국교육학술정보원법 | 필수 | ID, 비밀번호, 성명, 생년월일, 신분(직업구분), 이메일, 소속분야, 웹진메일 수신동의 여부 | 3년 또는 탈퇴시 |
선택 | 소속기관명, 소속도서관명, 학과/부서명, 학번/직원번호, 휴대전화, 주소 |
구분 | 담당자 | 연락처 |
---|---|---|
KERIS 개인정보 보호책임자 | 정보보호본부 김태우 | - 이메일 : lsy@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0439 - 팩스번호 : 053-714-0195 |
KERIS 개인정보 보호담당자 | 개인정보보호부 이상엽 | |
RISS 개인정보 보호책임자 | 대학학술본부 장금연 | - 이메일 : giltizen@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0149 - 팩스번호 : 053-714-0194 |
RISS 개인정보 보호담당자 | 학술진흥부 길원진 |
자동로그아웃 안내
닫기인증오류 안내
닫기귀하께서는 휴면계정 전환 후 1년동안 회원정보 수집 및 이용에 대한
재동의를 하지 않으신 관계로 개인정보가 삭제되었습니다.
(참조 : RISS 이용약관 및 개인정보처리방침)
신규회원으로 가입하여 이용 부탁 드리며, 추가 문의는 고객센터로 연락 바랍니다.
- 기존 아이디 재사용 불가
휴면계정 안내
RISS는 [표준개인정보 보호지침]에 따라 2년을 주기로 개인정보 수집·이용에 관하여 (재)동의를 받고 있으며, (재)동의를 하지 않을 경우, 휴면계정으로 전환됩니다.
(※ 휴면계정은 원문이용 및 복사/대출 서비스를 이용할 수 없습니다.)
휴면계정으로 전환된 후 1년간 회원정보 수집·이용에 대한 재동의를 하지 않을 경우, RISS에서 자동탈퇴 및 개인정보가 삭제처리 됩니다.
고객센터 1599-3122
ARS번호+1번(회원가입 및 정보수정)