KCI등재
Gentamicin 고도내성 Enterococcus faecalis균주의 항균제감수성, R-플라스미드 및 항원의 특성연구 = Studies on Anfimicrobial Susceptibility and Characteristics of R-plasmids and Antigens of High-Level Gentamicin Resistant Enterococcus faecalis
저자
강현 (건국대학교 유전공학연구소)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1995
작성언어
Korean
주제어
KDC
510.5
등재정보
KCI등재
자료형태
학술저널
수록면
55-72(18쪽)
제공처
소장기관
임상검체에서 분리 동정한 E. faecalis균주에 대하여 gentamicin 및 타 항균제에 대한 감수성을 조사했고, R-플라스미드 DNA 패턴 및 제한효소에 의한 DNA 단편분석, filter-mating에 의한 gentamicin 플라스미드 DNA 전이, R-플라스미드 DNA 제거, tetracycline 내성 유전자 확인, 항원분석을 실시하였다. 분리된 40주 E. faecalis 모두가 gentamicin에는 내성이었고, 25주는 요 검체에서 분리되었으며, 이 40균주들 중 95%가 입원환자에서 분리되어 중요한 원내감연균임을 알 수 있었다. Gentamicin 고도내성 E. faecalis는 24주(60%)이었고, 최소억제농도의 범위는 ampicillin이 1∼64㎍/ml, Chroramphenicol 이 8∼128㎍/ml과 erythromycin 128㎍/ml, vancomycinol 1∼2㎍/ml이었다. 분리한 Gentamicin 고도내성 E. faecalis HL-1은 4가지 항균제에 모두 내성이었고, 7종류의 플라스미드가 있었다. HL-2와 HL-3은 모두 6종류, HL-4는 7종류, HL-5는 4종류 그리고 HL-6은 5종류의 플라스미드가 있었다. E. faecalis HL-1과 HL-6의 내성전달 빈도는 6.3×10-⁴과 3.7×10 이었으며, E. faecalis HL-1의 내성전달 빈도가 높았다. 접합에 의해 E. faecalis HL-6의 플라스미드 중 51.7 Kb 크기의 전이된 DNA가 확인되어 gentamicin 내성이 플라스미드 전이에 의한 것임을 알 수 있었다. Tetracycline 유전자는 E. faecalis transconjungants R-1의 2.15 Kb 플라스미드에 있었다. 공여균주 및 transconjugants균주의 항원성을 Immunoblotting으로 분석한 결과 E. faecalis HL-1과 E. faecalis transconjugants R-1균주는 97.8, 46.8 Kd의 분자량을 갖는 단백질과 공통적으로 반응하였고, E. faecalis HL-6와 E. faecalis transconjugants R-6균주는 46.8 Kd의 분자량을 갖는 단백질과 공통적으로 반응하였다. 그 반응의 강도는 85.8, 97.8, 46.8, 33.7, 63.5와 74.8 Kd 순이었다. 공여균주 E. faecalis HL-6에서는 반응하지 않았던 97.8, 95.8, 74.8와 63.5 Kd의 단백질이 E. faecalis transconjugants R-6균주에서 반응하였다. 이들 종 특이성 단백질을 Invitro에서는 배양되지 않는 E. faecalis에 대한 혈청학적 진단의 항원으로 이용한다면 유용할 것이다.
Forty gentamicin-resistant isolates of Enterococcus faecalis were selected from various clinical materials, determined their antimicrobial susceptibility, and studied there R-plasmid characteristics and polypeptide patterns. All of the isolates were susceptible to vancomycin. The MICs(㎍/ml) of antimicrobial agents to the isolates were as follows; the MIC of gentamicin was 128 and ≥2040, ampicillin 1 and 1, chloramphenicol 2 and 8, erythromycin 32 and 256, and vancomycin 1 and 2. E. faecalis HL-1 strain had 8 plasmid DNA elements, HL-2 and HL-3 strains had 6, HL-4 had 7, HL-5 had 4, and HL-6 had 5. The 51.7 Kb of gentamicin resistance plasmid DNA was conjugally transferred from two strains of E. faecalis HL-1 and HL-6 to S. aureus SK 982. The plasmid transfer frequency between S. aureus SK 982 and E. faecalis HL-1 or E. faecalis HL-6 was 6.3×10-⁴ and 3.7×10 , respectively. Plasmid curing ratio after the treatment of ethidium bromide(10 ㎍/ml) to E. faecalis tarnsconjugants R-1 and R-6 were about 51% and 67%, respectively. The tetracycline gene was located in 2.15 Kb plasmid of E. faecalis its HL-1, but it was not found in the E. faecalis HL-6 by Southern blot analyses.
The antigenic components of E. faecalis HL-1, HL-6, R-1 and R-6 strains were analyzed by SDS-PAGE and immunoblotting. The E. faecalis strains had 7 to 16 polypeptide bands, however their major proteins were 97.8 and 26.8 Kd. At the Immunoblotting, 97.8, 95.8, 74.8, 63.5, 33.7 and 26.8 Kd polypeptides of the strains showed major antigenic activities with patient's sera infected intra-abdominally with an E. faecalis strain.
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