단백 methylase 억제제 5´-Isobutyl-5´-deoxyadenosine과 sinefungin에 의한 BALB/c mouse 비장세포의 증식과 분화의 억제 = Suppression of BALB/c Mouse Splenocyte Proliferation and Differentiation by Methylase Inhibitors, 5´-Isobutyl-5´-deoxyadenosine and Sinefungin
Whether or not protein methylation can be correlated with cell proliferation and differentiation in BALB/c mouse splenocyte cultures has been investigated by using methylase inhibitors, 5'-Isobutyl-5'- deoxyadenosine(SIBA) and sinefungin.
1) Protein methylase I and III activities were found to be elevated in LPS stimulated splenocytes, and the peak of protein methylase I was correlated with that of S phase fraction while changes in protein methylase III activity followed the changes in S phase fraction.
2) SIBA and sinefungin were proved to be potent competitive inhibitors of the protein methylase 'I and III in vitro with apparent Ki for sinefungin of both enzymes being lower than that for SIBA.
3) The protein methylase III were activated by 2-mercaptoethanol and dithiotreitol, and strongly inhibited by Cue+ in vitro; and the inhibition was almost completely released by dithiotreitol and diethyldithiocarbamate.
4) The extent of polyclonal antibody formation, S phase fraction and protein synthesis after induction by LPS were significantly inhibited in a dose response manner by SIBA and sinefungin with higher potency for the former.
5) Inhibition of cell cycle was also observed in the presence of cyloleucine, an inhibitor in SAM synthesis.
6) Of several enzymes investigated, namely protein methylase III, LDH, yglutamyltranspeptidase, and adenosine deaminase, the- protein methylase III was most markedly increased by LPS and decreased by SIBA and sinefungin than other enzymes.
From the above results, it is suggested that SIBA and sinefungin suppress the cell proliferation and differentiation through the inhibition of protein methylation.
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