SCOPUS
KCI등재
Molecular Cloning of Serratia marcescens Chitinase Gene into Escherichia coli = Strratia marcescens Chitinase 유전자의 대장균에로의 클로닝
저자
Chang, Kyu Il (Department of Microbiology, Gyeongsang National University) ; Kim, Ki Seok (Department of Microbiology, Gyeongsang National University) ; Cho, Moo Jae (Department of Biochemistry, Plant Molecular Biology and Biotechnology Research Center(PMBBRC), College of Natural Sciences, Gyeongsang National University) ; Lee, Sang Yeol (Department of Biochemistry, Plant Molecular Biology and Biotechnology Research Center(PMBBRC), College of Natural Sciences, Gyeongsang National University) ; Shin, Yong Chul (Department of Microbiology, Plant Molecular Biology and Biotechnology Research Center(PMBBRC), College of Natural Sciences, Gyeongsang National University)
발행기관
학술지명
한국미생물·생명공학회지 (Korean Journal of Microbiology and Biotechnology)
권호사항
발행연도
1992
작성언어
English
주제어
KDC
570.6
등재정보
SCOPUS,KCI등재
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
129-135(7쪽)
제공처
소장기관
본 연구에서는 Serratia marcescens ATCC 27117 균주로부터 키티나아제 유전자를 대장균으로 클로닝하고 발현시켰다. pUC 19 플라스미드를 이용하여 S. marcescens의 genomic library를 만들고 팽화된 키틴이 포함된 한천배지에서 키티나아제 활성을 가지는 클론을 선별하였다. 약 1×10^4 transformant들 중에서 키티나아제 활성을 보이는 하나의 클론을 선발하였으며 이것은 pUC 19 플라스미드속에 8.9Kb 염색체 DNA 삽입단편을 가지고 있었다. 이 키티나아제 유전자는 SDS-PAGE와 활성염색법으로 확인해본 결과 S. marcescens의 5가지 키티나아제 아이소자임 중에서 58 KD 키티나아제를 coding하는 것으로 나타났다. 8.9 Kb DNA 삽입단편의 제한효소 지도를 작성하였고, 이 유전자를 함유한 대장균은 식물병원성 곰팡이 Fusarium oxysporum의 성장을 저해하는 것으로 나타났다.
A chitinase gene of Serratia marcescens ATCC 27117 was cloned and expressed in Escherichia coli. A genomic library of S. marcescens was constructed with pUC 19 and screened using the swollen chitin agar plate for chitinolytic clones. A positive clone showing chitinclearance contains a recombinant pCHI 89, composed of 8.9 Kb chromosomal DNA fragment and pUC 19. Plasmid pCHI 89 produced 58 KD chitinase in E. coli, which was coincided with one of five extracellular chitinases produced by S. marcescens. Restriction endonuclease cleavage sites of the 8.9 Kb insert DNA fragment were mapped. E. coli JM109 harboring pCHI 89 inhibits the growth of a plant pathogenic fungus, Fusarium oxysporum.
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