Breeding of Thermotolerant and Ethanol Tolerant Yeast Strains by Protoplast Fusion of Saccharomyces cerevisiae and Kluyveromyces marxianus = 세포융합에 의한 고온, 고농도알코홀 내성효모의 육종
저자
Park, Hyung-Sook (생물학과)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1987
작성언어
English
KDC
040.000
자료형태
학술저널
수록면
71-84(14쪽)
제공처
소장기관
고온내성, 고농도알코홀 내성을 가진 발효성효모를 얻기위하여 원형질체 융합으로 육종을 시도하였다. Saccharomyces cerevisiae K701은 30℃에서 23.6%(v/v)의 고농도알코홀을 생산하는 알코홀내성효모이며, Kluyveromyces marxianus 115-6은 50℃까지 증식이 가능하고 43℃에서 7.15%(v/v)의 알코홀을 생산하는 고온내성효모로서 이 두 균주를 친주로 선택하였다. 융합주의 선별을 위하여 영양요구성변이주를 사용하였으며 변이주는 3% ethylmethanesulfonate (EMS)를 처리하여 유발시켰다. 돌연변이율은 8.3×10??으로 나타났다.
이들중 아미노산과 핵산요구성 및 Cycloheximide내성을 가진 변이주를 표식으로 하여 polyethyleneglycol(PEG) 6000과 CaCl₂의 존재하에서 융합시켰다. 융합빈도는 변이주에 따라 차이가 있었으며, 6.4×10??∼1.8×10??으로 나타났다. 융합주 13주를 선발하여 친주와 그 성질을 비교한 바 고온내성 알코홀내성은 친주에 비하여 떨어졌으나 이 방법에 의하여 융합주가 얻어졌으므로 친주의 생리적 성질차이를 분석하고 융합방법을 개량하며 아울러 고온, 고농도알코홀 내성의 분자생물학적 규명을 병행하면 더 효율적인 융합주를 얻을 것으로 전망하고 그 개발을 계속 검토중이다.
A study was undertake to obtain a novel fusant which has a prominent characteristics in both thermo-and ethanlo tolerance via protopalst fusion. We investigated the ethanol productivity of yeast strain Saccharomyces cerevisiae D701, and found that this strain is the highest yield of 23.6(v/v) at 30℃ and also investigated Kluyveromyces marxianus 115-6, which could grow even at 50℃ and its ethanlo productivity was the highest at 43℃ (7.15% v/v). Auxotrophic mutants as the selective marker were selected from umtagenesis by mean of 3% ethylmethanesulfonate (EMS). The frequency of auxotrophs was 8.3×10³. Protoplast from auxotrophs with a mino acid requirement and cycloheximide resistance was fused in the presence of CaCl₂ and polyethleneglycol(PEG) 6000. These fusants obtained were selected as regenerated colonies on a minimal medium. The frequency of fusant formation varied depending upon the strain and was 6.4₂10?? to 1.8₂10??. These fusants revealed that they were of inferior quality than the parental strains in terms of ethanol production at high temperature and ethanol tolerance. However, the protoplast fusion work for the two spceies must be continued. In fact, fusants were obtained, therefore, the probability will be expected the desired hybrid can be produced. The research for strains of thermo and ethanol tolerance must be continued in terms of elucidating the genetical and molecular biological principles.
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