Candids kefyr CBS 834의 β-galactosidase를 cellulose triacetate에 고정화하였다. 효소를 고정화하기 위한 최적조건은 100㎖ methylene chloride에 10g의 cellulose triagetate를 용해한 액에 효소액 15%을 첨가하여 만든 후, 200 strokes/min으로 진탕반응했을 때 얻어졌다. 또한 섬유의 절단길이는 효소활성에 큰 영향을 주지 않았다. 고정화효소의 최적온도와 pH는 각각 50℃와 7.0이었고, 활성화에너지는 8,539 cal/mole이었다. ONPG를 기질로 하였을 경우 고정화 효소의 K_m과 V_(max)은 각각 7.4×10^(-5)M과 66.7 unit/㎎ protein이었고, 유당에 대한 K_m과 V_(max)은 3.3×10^(-4)M과 29.4 unit/㎎ protein이었다. 고정화 효소를 4℃에서 30일간 저장후 잔존활성과 3회 재사용후 잔존활성을 조사할 결과 각각 95%와 94%을 유지하였다. 고정화 효소 1g(190 unit)을 50㎖의 탈지유와 5% 유당용액에 첨가한 후 30℃에서 10시간 반응시켰을 때 각각 10%와 15%의 유당분해율을 보여주었다.
β-Galactosidase from Candida kefyr CBS 834 was immobilized in the cellulose triacetate. The optimal condition for the immobilized enzyme was obtained by 15% of the enzyme solution added to 100㎖ of methylene chloride and 10g of cellulose triacetate. The length of fiber had hardly any an effect on the enzyme activity and the optimal condition for reciprocating water bath shaker was 200 strokes per minute. The optimal temperature and pH for the immobilized enzyme were 50℃ and 7.0, respectively. The activation energy for the immobilized enzyme was 8,539 cal/mole. The Km and Vmax of the immobilized enzyme, on ONPG were 7.4 × 10^(-5)M and 66.7 unit/㎎ protein, whereas those on lactose were 3.3 × 10^(-4)M and 29.4 unit/㎎ protein, respectively. The rate of remained enzyme activity for the immobilized enzyme stored at 4℃ for 30 days was 95%, and when reused for three times was 94%. When the skim milk (4.8% lactose) and 5% lactose solution of 50㎖ were reacted with the immobilized enzyme (190 unit) for 10hrs at 30℃, 10% of the lactose in skim milk was hydrolyzed, whereas 15% of the lactose in 5% lactose solution was hydrolyzed.
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