Streptomyces 속 해양 방선균이 생산하는 물질의 정제 및 항균 활성 = Purification of Compound Produced by a Marine Bacterium, Streptomyces sp. and Antibacterial Activity
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2018
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11-18(8쪽)
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본 연구에서는 항 MRSA 활성 및 우수한 항균활성을 나타내는 해양미생물 Streptomyces sp. DG-3 균주를 분리, 동정하고 그것의 생리, 생화학적 특징을 조사하였으며, 이 균주가 생산하는 항균 활성물질을 분리, 정제하고 장차 신규 항생제제로서의 가능성을 제시하고자 하였다.
울진에서 해수를 sampling한 후 가장 강력한 anti-MRSA 활성을 나타내는 DG-3 균주를 선택하여 PPES-II 배지에서 25℃에서 100rpm으로 24시간 배양 후 생리, 화학적 특징을 조사하고 분류, 동정하여 Strpetomyces sp. DG-3으로 명명하였다. 또한 ethyl acetate, C18 ODS open column을 순차적으로 이용하여 항균활성 및 anti-MRSA 활성을 나타내는 물질을 정제하였다.
80 μg/disk 농도에서 DA 8과 DA 16 균주 및 Bacillus subtilis KCTC 1028 균주에 대해서 14mm 이상의 저해환을 형성하였다. 그람 양성/음성균에 대한 항균활성을 살펴본 결과, 균주에 따라 활성은 조금 차이가 있었지만, 기존의 다른 항생제들과 마찬가지로 대체로 gram negative strain 보다 gram positive strain에 더 높은 항균활성을 나타내었다. 더욱 정제한 결과 C<sub>18</sub> ODS 80% MeOH층에서 가장 높은 활성을 보였다. 즉 C<sub>18</sub> ODS 80% MeOH층의 물질을 80 μg/disk 농도에서 항균활성을 측정한 결과, DA 8 균주에 대해 10mm의 저해환을 보였고, 저온성 병원성균인 Legionella briminghamensis KCTC 2007 균주에 대해서 13mm의 저해 활성을 보였다. 특히 항생제 내성균주인 MRSA KCCM 40511 균주에 대해서는 20mm 이상의 높은 저해 활성을 보였다.
이상의 결과 향후 DG-3으로 부터 순수분리 정제된 최종물질의 화학적 특성을 파악하고, 구조를 NMR을 통하여 규명하고, 작용기작을 밝힌다면 장차 차세대 항생제로서의 개발 가능성이 높을 것으로 판단된다.
It was isolated marine bacterium, isolate DG-3 which produced a bactericidal antibiotics against MRSA. This isolate was identified as tested by examining its morphological and biochemical properties, and 16S rRNA sequencing analysis for identification. This isolate DG-3 was identified to the genus Streptomyces. Therefore, this isolate was designated Streptomyces sp. DG-3. Streptomyces sp. DG-3 relatively grows well in the 25℃, pH 7.0, NaCl 1.0 %. For the purification of the bioactive compounds, DG-3 was fermented in 30 L Nutreint broth medium, and culture filtrates of DG-3 was extracted by ethyl acetate. The ethyl acetate extract of DG-3 was showed the significant anti-MRSA (methicillin-resistant Staphylococcus aureus) activity. The ethyl acetate extract was separated by C18 ODS open column. Compared with penicillin G and ampicillin, 80% MeOH fraction of C18 ODS has the significant antibacterial activity against Legionella briminghamensis KCTC 2007 strain and MRSA KCCM 40511 strain.
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