Modified SDHase stain = Modified SDHase stain
저자
발행기관
학술지명
조직세포검사학회 발표자료집(The Korean Society for Histology & Cytology Laboratory)
권호사항
발행연도
2007
작성언어
Korean
자료형태
학술저널
수록면
12-12(1쪽)
제공처
중단사유
※ KISS의 서비스 중단으로 원문이 제공되지 않습니다.
배경: 근질환 진단을 위해 실시하는 근육조직 생검의 검사방법은 파라핀 블록 제작 후 일반염색 (H&E) 법과 액체질소 동결후 실시하는 효소조직화학 그리고 전자현미경 검사가 있다. 효소조직화학 방법은 ATPase, NADH-TR, SDHase가 있으며 이중 SDHase는 미토콘드리아에 있는 Succinic dehydrogenase의 활성을 검사하기 위한 방법이다. 기존 SDHase 염색법은 표본이 완성된 후 서서히 탈색되어 영구보관이 어렵고 즉시 판독할 수 없는 경우 그 한계를 보여 수정 보완된 방법을 소개한다. 기존에 사용하던 방법에 비해 반응시간이 짧고, 간단하며 염색성 또한 선명하여 문제가 되었던 점을 보완하게 되었다. 방법: 기존에 사용하던 방법에서 37°C incubation 반응 시약에는 0.2M phosphate buffer, sod. succinate, NBT solution이 필요로 하며, 후 고정액으로 10% formal-saline sol. & 15% Ethanol을 사용하였다. 반면에 새로운 방법에선 incubation 시약으로 0.1M phosphate buffer, sod. succinate, NBT에다 3종류의 시약 EDTA, KCN, phenazine methosulfate를 첨가해 pH 7.6으로 측정한 후 여과하여 반응시켰다. 결과: 3종류의 시약을 첨가하여 정확한 pH측정으로 완성된 표본은 기존 방법에 비해 type 구별이 잘 되면서 비교적 염색성이 우수하고 영구보관이 가능한 양질의 표본을 얻게 되어 용이한 판독이 이루어지게 되었다. 고찰: SDHase는 미토콘드리아 질환을 진단하기 위한 중요한 염색이고, 기존 방법은 표본이 탈색되어 판독에 어려움이 많아 새로운 방법을 모색해 보았다. Incubation sol.은 기존 방법에다 EDTA, KCN, phenazine methosulfate를 혼합하고, pH 7.6으로 측정한 후에 여과하여 반응시켰다. 최적의 pH incubation sol.과 반응한 결과, 진하고 선명한 염색성에 type 구분이 뚜렷하여 진단을 위한 양질의 SDHase 표본을 얻을 수 있었다. 봉입 후 표본이 그대로 보존되어 탈색현상도 없고 영구보관이 가능하여 즉시 판독할 수 없더라도 문제가 되지 않았다. 본 방법은 반응시간이 짧아 간단하고 편리하며 염색성 또한 선명해 많은 장점이 있다고 생각한다. 검사실에서 SDHase 표본 제작시 많은 참고가 되어 유용하게 사용되길 바란다.
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