Free radical is related to TNF-α-regulated differentiation in ROS17/2.8 osteoblasts = TNF-α에 의한 조골세포 분화 억제시 유해산소의 영향
저자
Lee, Keun-Yoon (Dept. of Dental Pharmacology, School of Dentistry, Wonkwang University) ; Kim, Dae-Eop (Dept. of Dental Pharmacology, School of Dentistry, Wonkwang University)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2003
작성언어
English
KDC
515.000
자료형태
학술저널
수록면
437-450(14쪽)
제공처
골의 분화는 골의 생성 및 흡수에 주요한 인자로 치주질환을 비롯한 다양한 염증현상에서 염증성 cytokine중의 하나인 Tumor necrosis factor-α (TNF-α)로 인한 분화억제기전을 본 실험을 통해 살펴보고자 하였다.
k본 연구를 위해 조골세포 분화의 대표적 표지 인자인 Alkaline phosphatase(ALP) activity를 p-nitrophenylphosphate(PNPP)를 기질로 사용하여 측정하였으며 transcription factor의 활성을 확인하기 위하여 electromobility shift assay를 시행하였다. NF-B의 영향을 확인하기 위하여 NF-kB를 세포질내에서 결합하여 억제하고 있는 IkBα의 degradation여부를 immunoblotting을 통해 확인하였다. 한편 IkBα의 degradation이 안되도록 mutation시킨 dominant-negative IkBα를 lipofectamin을 사용 transfection시켰다.
조골세포는 골의 재생에서 주요한 역할을 담당하고 있으며 다양한 농도의 TNF-α(0, 0.5, 1, 2, 5 or 10ng/ml)는 조골세포 분화의 대표적 표지 인자인 ALP activity를 억제함을 보여주고 있다. 한편 조골세포에서 TNF-α(10ng/ml)는 NF-kB DNA binding activity를 억제함을 확인하였으며, free radical scavenger인 N-acetyl cysyeine(NAC)의 전처치로 TNF-α로 인한 NF-kB활성이 억제됨을 알 수 있다. TNF-α처치로 IkBα 및 IkBΒ의 degradation를 야기, 활성화된 NF-kB가 nucleus내로 이동, gene transcription이 발생될 수 있음을 보여주고 있다. IkBα의 신호전달 경로가 조골세포의 분화조절에 중요한 인자로 작용하는지를 확인하고자, IkB(KD) transfected ROS 17/2.8 cell을 이용하였다. 이 IkB(KD) transfectants는 TNF-α처리조건에서 ALPase의 활성을 억제하지 않았다.
Free radical과 조골세포의 분화와의 상호관련성을 언급하고 있는 본 연구에서 IkBα,Β 및 NF-kB는 NAC의 억제 기전을 설명하고 있으며 NF-kB transcription factor가 골의 분화에 주요 매개체임을 시사하고 있다.
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