Immunomodulatory Effect of Flavonol-rich residual layer of hexane fraction from Rhus verniciflua Stokes by upregulation of Th1 cytokines and downregulation of interleukin-17
저자
발행사항
서울 : 경희대학교 대학원, 2016
학위논문사항
학위논문(박사)-- 경희대학교 대학원 : 임상한의학과 침구학전공 2016. 8
발행연도
2016
작성언어
영어
주제어
DDC
616-F 판사항(22)
발행국(도시)
서울
기타서명
옻나무 추출물의 Th1 cytokine, interleukin-17조절을 통한 면역 조절 효과
형태사항
iv, 40 p. : 삽화 ; 26 cm
일반주기명
경희대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
지도교수: 이재동
참고문헌: p.
UCI식별코드
I804:11006-200000301089
소장기관
Rhus verniciflua Stokes has been traditionally used as an antioxidant, antirheumatic, anti-inflammatory agent. Although the anti-inflammatory effects of Rhus verniciflua Stokes in macrophages have been reported, little is known about the immunomodulatory activity of R. verniciflua Stokes. We investigated whether the flavonoid-rich residual layer of the hexane fraction from R.verniciflua Stokes (RVHxR), which removed allergenic urushiol from R. verniciflua has immunomodulatory properties.
We examined the immunomodulatory activities of RVHxR by using mouse splenocytes. The splenocyte proliferation induced by the T cell mitogen Con A was significantly affected by RVHxR. Flow cytometric analysis showed that following the RVHxR treatment, the percentage of T cells (CD4+/CD8+ and CD4+/CD25+) increased in splenocytes. RVHxR increased the production of Th1 cytokines. Furthermore, RVHxR inhibited the mRNA expression of interleukin-17 in Con A/TGF-β induced splenocytes and LPS-treated macrophages. Anti-inflammatory activity was assayed based on the inhibitory activity of inflammatory chemokines, cytokines produced by LPS-stimulated RAW 264.7 cells. RVHxR inhibited the production of LPS-induced chemokines, cytokines and inhibited the phosphorylation of NF‐κB and phosphorylation of JNK1/2. These results suggest that RVHxR has immunomodulatory activity, which can activate Th1 cytokines, and suppress IL-17 production. Thus, it may be useful as a therapy for immune system diseases.
목적: 옻나무 추출물인 RVHxR이 항염증 작용뿐만 아니라 동물 세포에서 면역조절에 어떠한 효과를 가지는지 확인하여, 향후 류마티스 관절염등 자가 면역질환에 보다 근본적인 치료제로 활용되기 위한 효능 및 안전성 연구의 기초적 자료를 제공하고자 한다.
방법: 세포 내 실험으로, Con A 및 LPS를 이용하여 쥐의 비장세포를 활성화시켰으며 다양한 농도의 RVHxR을 투여한 후 세포 증식 정도를 측정하였다. cell viability는 MTT assay를 통하여 측정하였다. 유세포 분석기를 이용하여 T 림프구를 변화를 측정하였으며 Th1 cytokine 과 Th2 cytokine 분비 효과를 측정하기 위해 ELISA kit 을 사용하였다. RT- PCR을 통하여 IL-17, MCP-1, CXCL-10, IL-8 유전자 발현을 측정하였다. NF‐κB, JNK1/2의 인산화 정도를 Western blot을 통하여 확인하였다.
결과: RVHxR은 세포 생존도에 영향을 미치지 않으면서, Th-1 cytokine 분비를 높이고 중요한 염증 발현 물질인 IL-17 의 발현을 억제했다. 또한 염증성 cytokine 및 chemokine의 분비를 줄여 염증반응을 감소시켰으며 NF‐κB, JNK1/2의 인산화를 억제시켰다.
결론: RVHxR은 T cell 과 Th1 cytokine 을 활성화 시키고 IL-17의 생산을 억제하는 면역 조절 활성을 가진다는 것을 확인했다. 본 연구를 기초로 RVHxR을 향후 자가 면역 질환 치료제로서 활용하기 위한 임상 연구의 적용이 가능하리라 기대된다.
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