1995년도 무균성 뇌막염 환아에서 원인바이러스 동정 = Isolation of Enterovirus in Patients with Aseptic Meningitis in 1995

국문 초록 (Abstract)

목 적 : 뇌막염은 뇌막의 염증성 반응으로 여러 가지 병원균에 의해서 올 수 있다. 특히 소아에서는 무균성 뇌막염이 많은 것으로 알려져 있고 이중 대다수가 바이러스에 의한 것이다. 특히 장바이러스가 무균성 뇌막염의 약 85 % 를 차지하고 있다. 1993년도 우리 나라에서는 echovirus 9, 30 에 의한 뇌막염의 전국적인 대유행이 있었고 1994년도에는 echovirus 3 에 의하여 뇌막염이 초래되었다. 이러한 뇌막염의 원인 바이러스는 매년 달라질 수 있으므로 1995년도 봄철에 뇌막염으로 입원하는 환자들의 원인 바이러스를 동정하여 보는 바이다.

방 법 : 1995년도 5월과 6월에 걸쳐 연세대학교 의과대학 세브란스병원 소아과에 입원하여 무균성 뇌막염으로 진단된 환아 19 례 를 대상으로 임상적 관찰 및 바이러스동정을 시행하였다. 가검물은 환아의 뇌척수액과 대변을 동시에 채취하여 배양된 RD 세포와 HEp-2 세포에 접종하여 세포병변을 관찰한 후 enterovirus serum pool 에 의한 중화시험을 하였다. Piore 와 Nicoletta 의 방법에 의하여 세포배양액에서 RNA 를 추출하고 PCR 에 의하여 oligonucleotide 를 합성하였다. 그 후 noncoding RNA PCR 에 의하여 DNA 를 합성하고 전기영동을 거쳐 확인하였다.

결 과 :
1) 임상양상 및 경과는 전형적인 무균성 뇌막염의 양상을 보였다.
2) 총 19 례 중에서 8 례 에서 enterovirus 가 자랐으며, 이 중 5례 에서는 coxsackie B3 가 동정되었으며 3 례 에서는 echovirus 7 이 1 례 에서는 echovirus 3 이 동정되었다. 이중 1 례 에서는 coxsackie B3 와 echovirus7 이 동시에 동정되었다.
3) PCR product도 전형적인 장 바이러스에 합당한 소견을 보였다.

결 론 : 1995년도 봄철에 연세대학교 의과대학 세브란스병원 소아과에 무균성 뇌막염으로 입원한 환자의 원인바이러스는 coxsackie B3 와 echovirus 7 에 의한 감염이었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Background : Aseptic meningitis is a common illness during childhood. Although the etiologic agent is not always identified, viruses are the usual responsible agents. Enterovirus especially causes approximately 85% of all cases of aseptic meningtis. In 1993, there was a nationwide epidemic of aseptic meningitis by echovirus 9 and 30. And we reported that the cause of aseptic meningitis in 1994 was echovirus 3. This study was done to detect the causative virus of aseptic meningitis in 1995.

Methods : To isolate the causative viruses, stool and cerebrospinal fluid specimens from the patients with aseptic meningitis, who were admitted to Severance Hospital in 1995, were collected. Cultured RD cells and HEp-2 cells were inoculated with specimens to see the cytopathic effects. Neutralizing antibody tests using enterovirus serum pool were done on the specimens with the cytopathic effects. RNA was isolated from the cultured supernatants of the infected cells by Piore and Nicoletta method. Oligonucleotide was synthesized by PCR, which was run on polyacrylamide gel after purification with HPLC. After running the DNA produced by using Geneamp RNA PCR Kit, electrophoresis was
done.

Results : Enterovirus was isolated from 8 out of 19 patients. Among these eight, Coxsackie B3 was isolated in 5 patients. Echovirus 7 was isolated in 3 patients. In one of these patients, Coxsackie B3 and echovirus 7 was isolated simultaneously. Echovirus 20 was isolated in one patient. PCR product from these viruses showed a 154 bp band on gel electrophoresis, which was the same PCR product from echovirus 3 supplied from ATCC.

Conclusion : The causative viruses of aseptic meningitis in patients who were admitted to Severance Hospital during the spring season of 1995 were Coxsackie B3 and echovirus 7.