Cytosin arabinoside와 Vinblastine이 생쥐 纖維母細胞에 미치는 細胞 毒性에 關한 細胞 遺傳學的 硏究 = (A)cytogenetic study on the cytotoxicity of cytosin arabinoside and vinblastine on cultured mouse fibroblasts
저자
발행사항
광주: 全南大學校, 1990
학위논문사항
학위논문(박사)-- 全南大學校 大學院: 生物學科 1990
발행연도
1990
작성언어
한국어
주제어
KDC
474.33
DDC
574.873223 판사항(19)
발행국(도시)
전라남도
형태사항
58,[도판9장]: 삽도; 26cm
소장기관
抗癌劑인 cytosin arabinoside와 vinblastine이 생쥐의 纖維母細胞에 미치는 細胞毒性을 調査하기 위하여 纖維母細胞를 抗癌劑에 24時間 노출 시킨 후 neutral red(NR) 와 tetrazolium MTT<3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide>定量, 總蛋白質量 측정, micronuclei test, 染色體의 構造的 異常 및 姉妹染色 分體 交換을 조사하였으며 細胞의 形態 변화를 보기 위하여 光學 및 電子顯微鏡 으로 觀察하였다. Cytosin arabinoside의 NR-90과 NR-50은 各各 0.25 uM과 1.64 uM로 나타 났고 MTT-90과 MTT-50은 0.33 uM과 2.06 uM로 나타났으며 vinblastine의 경우 MTT-90과 MTT-50은 各各 0.006 uM과 0.03 uM로 나타났고 NR-90과 NR
50은 0.009 uM과 0.06 uM로 나타났다. Colorimetric assay 결과, NR-50과 MTT-50의 농도가 각각 100 uM보다 낮아서 세포독성은 아주 강함을 보였다.
總 蛋白質量은 cytosinl arabinoside의 경우 midpoint cytotoxicity value (MCV) 인 1.64 uM에서 73 ug/well로 對照群 107 ug/well에 비하여 62%였고 vinblastine의 경우 MCV인 0.03 uM에서 57 ug/well로 53%로서 두 藥劑 모두 總 蛋白質量이 有意하게 적게 나타나 細胞毒性을 나타냈다. Micronuclei의 頻度는 cytosin arabinoside의 경우 1.64 uM에서 1000개의 二核細胞당 151.33±33.08로 매우 높았다. Vinblastine의 경우 0.03 uM에서 129.67±29.57로 역시 높은 頻度를 나타내었으며 micronuclei의 크기는 염색체에 직접 손상을 주는 cytosin arabinoside보다 방추사에 손상을 주는 vinblastine에서 큰것으로 나타났다.
또한 두 藥劑 모두에서 染色體의 構造的 異常이 나타났으며 姉妹染色分體 交換 頻度에서는 cytosin arabinoside의 경우 1.64 uM에서 染色體당 0.553으로 높게 나타났고 Vinblastine의 경우도 0.03 uM에서 0.511의 頻度를 나타내 두 藥劑 모두 强한 mutagenicity를 나타 냈다.
光學顯微鏡的 觀察 에서는 cytosin arabinoside를 處理한 境遇 가늘고 긴 세포돌기를 볼 수 있었고 vinblastine의 경우 세포 전체가 위축되어 圓形에 가까운 형태를 보였다. 電子顯微鏡的 觀察에셔는 cytosin arabinoside를 처리한 세포에서 核내의 fragmental heterochromatin을 볼 수 있었고 細胞質에서 조면 내형질망의 조의 擴張과 多數의 농소체가 觀察되었으며 핵이 lobule형태를 나타냈고 세포질내에 다수의 공포를 볼 수 있었다.
以上의 結果를 綜合하여 볼때 cytosin arabinoside와 vinblastine이 생쥐 섬유모세포에 대하여 강한 mutagenicity를 나타내고 細胞의 新陳代謝에 障碍를 초래하여 細胞의 增殖과 成長을 沮害하는것으로 思料된다.
To investigate the cytotoxic effects of cytosin arabinoside and vinblastine on cultured fibroblasts, colorimetric assays of neutral red(NR) and tetrazolium MTT, protein content, mutagenicity test<micronuclei test, cytogenetic study, sister chromatid exchange(SCE)> and electron microscopic study were performed.
Cytosin arabinoside and vinblastine were highly toxic by showing that concentrations of NR-50 and MTT-50 of two drugs were lower than 100 uM.
The amount of total protein in anticancer drugs treated group was less than that of the control.
At midpoint cytotoxicity value of two drugs, frequencies of micronuclei SCEs were very high and chromosome showed structural abnormalities.
The size of micronuclei formed by vinblastine were larger than those induced by cytosin arabinoside.
Light microscopy revealed that mouse fibroblasts grown in the media added cytosin arabinoside had slender and long processes, whereas vinblastine treated cells were round in shape. Electron microscopy showed that fibroblasts treated with cytosin arabinoside had nucleus with fragmental heterochromatin and contained swollen mitochondria and many vacuoles, and vinblastine treated celles contained elongated and often lobulated nucleus and many cytoplasmic vacuoles.
These results suggest that cytosin arabinoside and vinblstine have highly mutagenic and severe cytotoxic effects on the cultured mouse fibroblasts.
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