배지와 배양조건에 따른 병원성 효모양 진균의 집락특성
칸디다증의 정확한 치료를 위해서는 임상미생물검사실에서 신속하고 정확하게 Candida 균종들을 분리하고 동정하는 것이 중요하다. 본 연구에서는 자동화 장비나 상용화된 검사 키트로 효모양 진균들을 동정할 때 도움을 줄 수 있는 집락의특성을 비교 관찰하였다. 배지는 진균 배양에 사용하는 Sabouraud dextrose agar(SDA) 및 CHROMagar와 세균의 배양에 일반적으로 사용하는 5% 면양혈액배지(SBAP), 맥콘키배지(MacConkey agar)를 사용하였다. 배양 조건은 산소환경, 무산소환경, 5% CO2 환경 등 배양조건 배양기간을 달리하여 집락의 특징과 성장속도를 비교하였다. 실험에 사용된 균주는 부산시의 한 종합병원에서 분리된 Candida albicans, Candida glabrata, Candida tropicalis, Candida parapsilosis, Trichosporon asahii, Candida krusei, Candida norvegensis, Candida lusitaniae, Cryptococcus neoformans, Rhodotorula spp., Geotrichum capitatum 11균종과 임상에서 드믈게 분리되는 Candida dubliniensis, Trichosporon mucoides, Stephanoascus ciferrii, Kodamaea ohmeri, Saccharomyces cerevisiae 5균종을 비롯하여, Vitek 2 자동화장비에서는 두 균종간의 감별이 어려운 Candida guilliermondii 와 Candida famata를 포함한 총 18균종 312균주를 이용하였다. 효모양 진균의 동정은 Vitek 2 system (bioMėrieux)의 ID-YST 카드를 이용하여 균종을 확인하였다. 드물게 분리 동정되는 균종과 배지에서 자란 집락의 성상과 자동화 장비결과가 일치하지 않은 균종들은 MALDI-TOF (bioMėrieux)를 사용하여 균종을 확인하였다. 5% 면양혈액배지에서 효모양 진균들은 모두 배양되었으며, 집락의 특징들을 관찰할 수 있었다. 맥콘키배지에서는 C. albicans, C. dubliniensis, C. norvegensis, C. lusitaniae, T. mucoides, K. ohmeri는 배양되지 않았다. 배양환경에서는 산소성 조건에서보다 5% CO2 환경에서 균의 성장속도가 빠른 것을 확인 할 수 있었고, C. albicans의 spike 집락은 5% CO2 환경에서만 형성되었고, 산소환경과 무산소 환경에서는 형성되지 않았다. 자동화 장비인 Vitek 2에 의한 효모양 진균의 동정결과와 배지에서 집락별 특성 및 색소배지에서 색깔변화의 일치율은 C. albicans, C. glabrata, C. tropicalis, T. asahii 등이 100%의 정확도를 보여 주었다. 따라서 색소배지와 세균배양에서만 사용하는 5% 면양혈액배지와 맥콘키배지의 특성만을 가지고도 효모양 진균의 균종(species)을 추정할 수 있었다.
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