Human clonorchiasis is one of the most common trematode diseases and of very inportant public health porblems in Korea. Many techniques have been deviced for immunological diagnosis of clonorchiasis. But, these methods have been recognized as low specificity and sensitivity.
In the present study the enzyme-linded immunosorbent assay(ELISA) test was demonstreted in the diagnosis of human clononchiasis using clonorchis VBS(veronal buffer solution) skin test antigen and peroxidase conjugated anti-human IgG, and ortho-phenylenediamine as a substrate by microminor modifications.
The results obtained are as follows :
1. In the preliminary study optimal dilutions of conjugate, stock antigen and serum were 1/5,000, 1/400 respectively.
2. The O.D.(optical density) values of the ELISA in the sera of clonorchiasis cases using stock antigen and VBS skin test antigen were 1.347±0.728 and 2.332±0.420 respectively, and the mean O.D. value in the sera of clonorchiasis cases using VBS skin test antigen was higher than that of stock antigen in sensitivity.
3. During the storage in a refrigerator, the mean O.D. value of the ELISA in 138 sera of clonorchiasis cases was 1.674±0.601 in the storage for 1 month and that in 244 sera of clonorchiasis casse was 1,494±0.884 from 6 months to 3 years.
4. In the distribution of the O.D. Values of the ELISA in the sera of clonorchiasis cases, 115 (83.3%) out of 138 sera in the storage for 1 month and 161 (66.0%) out of 244 sera in the storage from 6 months to 3 years showed higher O.D. value than 1.000(O.D. at 488nm) which is referedn to the positive serum.
5. The O.D. values of the ELISA in the sera were compared with the degree of infection by E.P.G. (eggs per gram of feces) counts in the stools of the clonorchiais cases and the regression equation was applied for the evaluation: y=0.004x+1.6637 (x : 1/100 of E.P.G; Y : O.D. values)
There was no correlation between the O.D. values of the ELISA and the number of egg In the results, the application of the ELISA in the diagnosis of human clonorchiasis using VBS skin test antigen within 1 month period storage seemed to be higher than stock antigen with long period storage in sensitivity. In conclusion, the present the present study suggests that the ELISA test can be applied in the diagnosis of human clonorchiasis as applicable and reproducible test in comparison with other immunological tests, especially in the sere-epidemiological study.
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