한국인에서 중합효소 연쇄반응-제한효소 절편 다형성을 이용한 HLA-DQB1 Genotyping과 대립유전자 출현 빈도에 대한 연구 = A Study on the Genotyping and Allele Frequency of HLA-DQB1 Gene Using Polymerase Chain Reaction Fragment Length Polymorphism in Koreans
저자
발행기관
建國大學校基礎科學硏究所(The Research Institute of Basic Sciences Kon-KuK University)
학술지명
권호사항
발행연도
1994
작성언어
Korean
주제어
KDC
404
자료형태
학술저널
수록면
35-41(7쪽)
제공처
소장기관
HLA classII 유전자는 높은 유전적 다형성을 가지므로 골수나 장기이식을 위한 조직 적합성 검사뿐 아니라, 개인식별 검사나 친자감별 검사 또는 HLA와 관련 있는 각종 질환의 검사 등에 많이 이용되고 있다. 최근 분자생물학의 발달로 HLA classII 영역의 유전적 다형성을 DNA 분자수준에서 검색하는 genotyping이 가능하게 되었다. 본 실험에서는 PCR-RFLP를 이용하여 표준 세포주 18개를 control로 하여 HLA-DQB1유전자의 genotyping을 실시하여 결과의 타당성을 검토하였으며 혈연관계가 없는 한국인 100명의 DNA를 분석하여 HLA-DQB1 유전자의 대립유전자 빈도를 구하였다.
The second exon of HLA-DQB1 genes was selectively amplified from genomic DNAs of 18 HLA-homozygous B cell lines and 100 unrelated koreans by the polymerase chain reaction. Amplified DNAs were digested with restriction enzymes which recognize allelic sequence variations in the polymorphic segments of the HLA-DQB1 second exon. The restriction enzymes used for HLA-DQB1 groupI were HinI, MspI, SacI, Sau96I, and those for HLA-DQB1 groupII were ApaI, HaeII, HhaI, MspI Hin1I. These wre subjected to electorphoresis in polyacrylamide gels.
From this results, PCR-RFLP method provides a simple and rapid technique for accurate definition of the HLA-DQB1 genotypes at the nucleotide level, elimination the need for radioisotope as well as allele specific oligonucleotide probes and can be applied to HLA-DR, DP typing.
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