대장균내에서의 재조합 트롬보포이에틴 발현에 대한 연구
저자
발행사항
논산 : 건양대학교 대학원, 2010
학위논문사항
학위논문(석사)-- 건양대학교 대학원 : 화학과 2010. 2
발행연도
2010
작성언어
한국어
발행국(도시)
충청남도
형태사항
; 26cm
일반주기명
지도교수 :심원보
소장기관
트롬보포이에틴(thrombopoietin)는 거핵구 생성 세포 과정과 혈소판을 생산과정에 관여하는 중요한 조절인자로서 주로 거핵세포 분화와 성장의 모든 부분에서 개시자역활을 한다. 특히 트롬보포이에틴은 혈소판의 생산에 영향을 주는 주된 조절자이다. 트롬보포이에틴은 인간 간세포에서 주로 생성이 되며, 혈액속에서 순환을 하다가 조혈모세포나 거핵세포 표면에 있는 트롬보포이에틴 수용체에 결합을 하여 작용을 한다. 353개의 아미노산으로 이루어져 있으며, 크게 2개의 도메인으로 구성되어 있다. N-말단도메인은 153개로서 적혈구 생성 촉진 인자인 에리스로포이에틴(erythropoietin)과 23% 일치하며, 50%가 유사한 구조를 지니고 있다. C-말단 도메인은 179개 아미노산으로 이루어져 있으며 6개의 N-link 글라이코단백질를 포함하는데, 특이한 점은 다른 어떠한 종들과도 유사점을 가지지 않는다. 또한 세린, 트레오닌, 프롤린 아미노산 잔기가 많이 존재한다. 본 연구에서는 거핵세포 분화과정에 영향을 주는 트롬보포이에틴을 재조합하여 발현 벡터를 구축한 뒤 많은 양을 얻었고, 분석을 통해 발현 유무를 확인하였다.
더보기The Thrombopoietin(TPO) is the principal regulatory cytokine of megakaryopoiesis and thrombopoiesis and promotes all aspects of megakaryocyte development. In particular, It is the major regulatory protein of platelet production. Human thrombopoietin is synthesized in the liver as a 353 amino acid precursor protein with a molecular weight of 36kDa. It is secreted into the circulation where it is mostly bound and removed by thrombopoietin receptors (c-mpl) on platelets and megakaryocytes. The first 21-153 amino acids of the mature protein are 23% identical with human erythropoietin and probably 50% similar if conservative amino acid substitutions are considered. Amino acids 154-332 comprise a unique sequence that contains six N-linked glycosylation sites and is less well conserved among different species. It is rich in serine, threonine, and proline residues. In this study, we report the construction, expression, and purification of recombinant human thrombopoietin. This reinforces the concept that thrombopoietin is an important stimulus for the growth of early progenitor cells of all lineages but only affects the late maturation of megakaryocytes and hence primarily affects platelet production. The availability of large amounts of pure and active rhTPO could facilitate further studies on its in vivo activities in promoting megakaryopoiesis and platelet recovery.
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