Synthesis of o-nitrobenzyl amine/alcohol derivatives for solid-phase organic synthesis and cell membrane protein isolation
저자
발행사항
서울 : 서울대학교 대학원, 2014
학위논문사항
학위논문(박사)-- 서울대학교 대학원 : 화학생물공학부 2014. 8
발행연도
2014
작성언어
영어
주제어
DDC
660.6 판사항(22)
발행국(도시)
서울
기타서명
고체상 유기 합성과 세포막 단백질의 분리를 위한 오쏘-나이트로벤질 아민/알코올 유도체들의 합성
형태사항
xvi, 134 p. : 삽화 ; 26 cm
일반주기명
참고문헌 수록
DOI식별코드
소장기관
Photochemistry is one of the unique and useful subdiscipline of chemistry. Photoreactive molecules, the core compounds in photochemistry, are undergone chemical reactions by irradiation of light, while remaining stable under various conditions such as acidic or basic reaction conditions. With such characteristic features, photoreactive molecules have been used as a linker for solid-phase organic synthesis or a photolabile protecting groups. Furthermore, the light with a wavelength above 315 nm does not give severe damages to biomolecules, and thus, the related photochemistry has been applied to chemical biology field.
In this thesis, o-nitrobenzyl amine/alcohol derivatives which can absorb UVA light (365 nm) well are synthesized for solid-phase organic synthesis and isolation cell membrane proteins. In the first part, a novel photocleavable linker which contains o-nitrobenzyl amine moiety was effectively synthesized in six steps with 33 % of synthetic yield, without any complex purification steps. Synthesized photocleavable linker could absorb UVA light with wavelength of 330 to 370 nm well, and showed similar or better photocleavage kinetics compared with established photolinkers. Based on these results, synthesized photocleavable linker was successfully applied to solid-phase organic synthesis. Leu-enkephalin amide (H-YGGFL-NH2) was synthesized by using photolinker-coupled polymer supports, with high purity. Acyl-phenylhydrazone of peptide C-terminus was oxidized by photo-oxidation of photocleavable linker, and peptide acid and ester were synthesized by addition of nucleophiles to acyl-phenyldiazene. Glycopeptides-immobilized polymer supports which can be applied to bioassays were prepared by imine formation reaction between glycans with peptides which coupled with polymer supports via photocleavable linker, and the glycopeptides were analyzed by mass spectroscopy analysis after photocleavage. The synthesized peptides on the photocleavable linker coupled polymer supports were analyzed by laser desorption-ionization mass spectroscopy method without using any additional cleavage steps and matrices.
In the second part of thesis, isolation method of the cell membrane protein by using o-nitrobenzyl alcohol moiety containing linkers is described. For the isolation of cell membrane protein, linkers which consisted of amine catchable part, photoreactive part, hydrophilic spacer, and tethering part for immobilization were synthesized. As functional group for tethering, azide which can undergo the copper assisted azide-alkyne cycloaddition reaction and biotin which has high affinity with streptavidin were selected. The reactivity of synthesized molecules toward amine and alkyne was confirmed by a model reaction with amino acids and 4-pentynoic acid in solution phase. Copper assisted azide-alkyne reaction underwent between azide labeled lysine with 4-pentynoic acid in solution-phase; however, it did not undergo between azide-labeled bovine serum albumin with 4-pentynoic coupled polymer supports. Instead of azide-containing molecule, biotin-containing molecule was used for the isolation of proteins. Bovine serum albumin was labeled with biotin-containing molecule, and this labeled protein was bound with streptavidin which immobilized on the beads. And also, cell membrane proteins of Escherichia coli which were labeled with biotin-containing molecule were bound with streptavidin-coated beads. Bound proteins were released from the beads by irradiation of UVA light. Isolated proteins were analyzed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, and compared with the results of authentic proteins.
분석정보
서지정보 내보내기(Export)
닫기소장기관 정보
닫기권호소장정보
닫기오류접수
닫기오류 접수 확인
닫기음성서비스 신청
닫기음성서비스 신청 확인
닫기이용약관
닫기학술연구정보서비스 이용약관 (2017년 1월 1일 ~ 현재 적용)
학술연구정보서비스(이하 RISS)는 정보주체의 자유와 권리 보호를 위해 「개인정보 보호법」 및 관계 법령이 정한 바를 준수하여, 적법하게 개인정보를 처리하고 안전하게 관리하고 있습니다. 이에 「개인정보 보호법」 제30조에 따라 정보주체에게 개인정보 처리에 관한 절차 및 기준을 안내하고, 이와 관련한 고충을 신속하고 원활하게 처리할 수 있도록 하기 위하여 다음과 같이 개인정보 처리방침을 수립·공개합니다.
주요 개인정보 처리 표시(라벨링)
목 차
3년
또는 회원탈퇴시까지5년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한3년
(「전자상거래 등에서의 소비자보호에 관한2년
이상(개인정보보호위원회 : 개인정보의 안전성 확보조치 기준)개인정보파일의 명칭 | 운영근거 / 처리목적 | 개인정보파일에 기록되는 개인정보의 항목 | 보유기간 | |
---|---|---|---|---|
학술연구정보서비스 이용자 가입정보 파일 | 한국교육학술정보원법 | 필수 | ID, 비밀번호, 성명, 생년월일, 신분(직업구분), 이메일, 소속분야, 웹진메일 수신동의 여부 | 3년 또는 탈퇴시 |
선택 | 소속기관명, 소속도서관명, 학과/부서명, 학번/직원번호, 휴대전화, 주소 |
구분 | 담당자 | 연락처 |
---|---|---|
KERIS 개인정보 보호책임자 | 정보보호본부 김태우 | - 이메일 : lsy@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0439 - 팩스번호 : 053-714-0195 |
KERIS 개인정보 보호담당자 | 개인정보보호부 이상엽 | |
RISS 개인정보 보호책임자 | 대학학술본부 장금연 | - 이메일 : giltizen@keris.or.kr - 전화번호 : 053-714-0149 - 팩스번호 : 053-714-0194 |
RISS 개인정보 보호담당자 | 학술진흥부 길원진 |
자동로그아웃 안내
닫기인증오류 안내
닫기귀하께서는 휴면계정 전환 후 1년동안 회원정보 수집 및 이용에 대한
재동의를 하지 않으신 관계로 개인정보가 삭제되었습니다.
(참조 : RISS 이용약관 및 개인정보처리방침)
신규회원으로 가입하여 이용 부탁 드리며, 추가 문의는 고객센터로 연락 바랍니다.
- 기존 아이디 재사용 불가
휴면계정 안내
RISS는 [표준개인정보 보호지침]에 따라 2년을 주기로 개인정보 수집·이용에 관하여 (재)동의를 받고 있으며, (재)동의를 하지 않을 경우, 휴면계정으로 전환됩니다.
(※ 휴면계정은 원문이용 및 복사/대출 서비스를 이용할 수 없습니다.)
휴면계정으로 전환된 후 1년간 회원정보 수집·이용에 대한 재동의를 하지 않을 경우, RISS에서 자동탈퇴 및 개인정보가 삭제처리 됩니다.
고객센터 1599-3122
ARS번호+1번(회원가입 및 정보수정)