SCOPUS
KCI등재
Bacillus circulans의 호산성 $\alpha$-amylase 유전자의 클로닝 및 발현 = Cloning and Expression of an Acidophilic $\alpha$-Amylase Gene from Bacillus circulans in Escherichia coli
저자
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2000
작성언어
Korean
주제어
등재정보
SCOPUS,KCI등재
자료형태
학술저널
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수록면
112-118(7쪽)
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Bacillus circulans KCT3004 유래의 호산성 $\alpha$-amylase 유전자가 pUC19을 vector로 하여 대장균 내에서 클로닝 되었다. 클로닝된 5.8kb Pst I DNA절편은 pUC19내에서의 삽입방향과는 무관하게 $\alpha$-amylans보다 약40배 정도의 높은 효소활성을 나타내었다. 본 연구에서 클로닝 및 발현된 효소의 최적 pH와 온도는 각각 pH 3.6 $45^{\circ}C$였으며, $40^{\circ}C$에서 1시간 동안의 사전 열처리에도 활성의 감소를 일으키지 않았다. 이 효소는 SDS-PAG와 zymogram을 통해 분석해 본 결과 분자량은 약 55,000으로 추정되었으며 기질로 starch만을 가수분해하여 maltoriose 이상의 올리고당 분자들을 주로 생산할수 있었다.
더보기A new gene encoding an acidophilic $\alpha$-amylase of Bacillus cil-culans KCTC3004 was cloned into Eschericlzia coli using pUC19 as a vector. The gene localized in the 5.8 kb PstI DNA fragment was expressed independently of its orientation in the cloning vector showing enzyme activity about 40 times greater than that produced by the original B, circulans The optimum pH and temperature of the cloned enzyme were pH 3.6 and 45^{\circ}C.$ respectively. The enzyme hydrolyzed starch to produce maltotriose and maltooligosaccharides. The SDS-PAGE and zymopram of the enzyme produced in E coli(p.4L850) indicated a molecular weight of 55,000.
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