서로 다른 기주식물로부터 한국산 겨우살이 렉틴의 Protein type Ⅱ(RIP's)의 ribosome 불활성화 = Lectin, ribosomal inactivating protein type Ⅱ(RIP's), of Korean mistletoe(Vsicum album var. coloratum) from different host-species
저자
발행사항
서울 : 동국대학교 대학원, 2005
학위논문사항
학위논문(석사)-- 동국대학교 대학원 : 생물학과 2005. 2
발행연도
2005
작성언어
한국어
주제어
KDC
489.44 판사항(4)
발행국(도시)
서울
형태사항
29p. : 삽도(일부 채색삽도) ; 26cm.
일반주기명
참고문헌: p. 26-28
DOI식별코드
소장기관
겨우살이는 겨우살이과의 반기생 식물로 우리나라와 유럽등지에서 사용되며 기주식물에 따라 효능이 다르다고 알려져 있다. 또한 겨우살이의 성분 중 렉틴은 항암억제에 효과가 월등한 것으로 알려져 있어, 이에 한국산 겨우살이 렉틴의 기주별/ 지역별 DNA 염기서열과 이것으로부터 유추된 아미노산 염기서열을 분석하였다. 분석한 렉틴 DNA 염기서열은 이미 알려진 유럽산 겨우살이 렉틴과 한국산 겨우살이 렉틴 등과 93% - 90% 까지 상동성을 나타내었다. 또한 아미노산 염기서열은 91% - 78% 까지 유사하게 나타났다. 이와 같은 결과는 본 실험에 사용한 한국산 겨우살이 렉틴이 이미 밝혀진 다른 렉틴 유전자와 명백히 차이를 나타내는 신 물질임을 알 수 있다. 또한 구조분석 결과 세포독성 부위(RIP) 와 결합 특이성 부위 (RICIN, Ricin_B_lectin) 가 존재함을 알 수 있었다. 또한 렉틴의 정제를 위해 affigel-15 에 ligand 로 asialofetuin 을 사용하여 친화 크로마토그래피를 하였다. 이것을 SDS-PAGE 법을 사용하여 렉틴의 분자량과 특성을 확인하였다. SDS-PAGE 결과, 렉틴의 분자량은 60 kDa 이었으며, 환원제를 처리 하였을 경우, 두개의 밴드 (MW = 30 - 28 kDa) 가 확인되었다. 한국산 겨우살이로부터 캘러스를 유도하여 겨우살이 식물체와 세포활성도를 비교하여 보았다. 분석 결과 MSA-a 가 캘러스 중 효율이 가장 높은 것으로 나타났다. 따라서 겨우살이 조직의 캘러스 유도를 통한 생리활성 물질에 대한 연구 가능성은 충분히 있다고 판단된다.
더보기Lectin genes, extracted. Korean mistletoe (Viscum album var. coloratum), from various host plant in three different provinces Kyongsangdo, Chollado, Kangwondo in Korea were analyzed sequences. It appeared 93-99% homology with European lectin genes and previously reported Korean lectin genes. This result indicated the homology 91-78% of amino acid sequence with previously reported European and Korean lectins. Predicted protein structure showed existence of RIP, RICIN, RICIN_B_Lectin. Hololectin was isolated from the calli by affinity chromatography consisting of asialoferuin bound to Affigel-15. Isolated proteins was identification as mistletoe lectin on SDS-PAGE compare with molecular weights, treated of reducing regent. The molecular weights of lectin were determined as a 60kD on SDS-PAGE and in case of treatment of reducing agent (2-mercaptoethnol), purified proteins showed two bands (30 and 28kDa), which indicated mistletoe lectin protein. Calli were induced from stems of Korean mistletoe (Viscum album var. coloratum). Cytotoxic effects were conformed in soluble calli extraction from Korean mistletoe (Viscum album var. coloratum). Effective cytotoxicity was evidenced in a MSA-a celli cell line.
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