닭 조직에 따른 Nebulin Isoform 단백질의 특이적 발현 = Tissue-Specific Expression of Nebulin Isoform Proteins in Chicken

국문 초록 (Abstract)

대부분 척추동물에서 골격근 내 filament들의 길이 조절은 근 수축 기작의 구조를 이해하는데 중요한 단서가 된다. Nebulin은 thin filament의 전체에 걸쳐있는 거대한 단백질로 골격근에만 특이적으로 존재하는 것으로 알려져 왔다. 본 연구에서는 닭의 근육과 비근육 조직에서 nebulin isoform 단백질들을 확인하기 위하여 전기영동과 immunoblot의 방법을 이용하였다. 각 조직의 단백질들은 soluble과 insoluble fraction으로 분리 준비하였다. 실험결과, 닭의 근육과 비근육 조직들에서 조직 특이성을 나타내는 다양한 nebulin isofrm 단백질들이 확인되었다. Nebulin은 성계의 골격근에서 500 kDa 정도의 크기로 나타났고, nebulett은 계배와 성계의 심장근에서 107 kDa 정도로 발현되었다. 그리고 계배의 비근육 조직인 뇌에서 380 kDa 정도의 거대 단백질이 확인되었다. 이 단백질은 뇌 조직의 soluble fraction에서 인지되었다. Nebulin isoform 단백질들이 서로 다른 조직에서 발현되는 양상을 보아 서로 다른 독자적인 기능을 가질 것으로 추정된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

The lengths of thick and thin filaments in the sarcomeres of most vertebrate skeletal muscles are precisely regulated and are important structural parameters in understanding muscle contraction.
Nebulin is a usually large protein that spans the whole length of thin filaments in the sarcomeres of skeletal muscles. In this paper we used SDS-PAGE and immunoblot to identify nebulin isoform proteins in muscle and non-muscle tissues. We prepared embryonic chicken tissues including skeletal muscle, cardiac muscle, smooth muscle, brain liver to compare nebulin isoform proteins. The proteins were divided into soluble and insoluble fraction. As a result, we identified tissue specific expression of various nebulin isoform proteins in muscle and non-muscle tissues of chicken. Nebulin was detected in skeletal muscle of adult chicken about 500 kDa. Nebulett was expressed in cardiac muscle of embryonic and adult chicken about 107 kDa. A giant protein with molecular mass of about 380 kDa was identified in brain of non-muscle of chicken. This giant protein was detected in the soluble fraction of chicken embryo. The unequal distribution of the nebulin isoform proteins suggests tissue specific regulation of the isoform expression and indicates a functional specialization of the encoded isoform subtypes.

목차 (Table of Contents)

• 서론
• 재료 및 방법
• 1.Anti-isoform F 항체 제작과 anti-nebulin 항체 준비
• 2.단백질 준비
• 3.단백질 정량과 전기영동
• 4.Immunoblot 분석
• 결과
• 1.Anti-isform F 항체와 anti-nebulin 항체를 이용한 단백질 발현 비교
• 2.계배의 단백질 발현 양상
• 고찰