SCOPUS
KCI등재
Distinctive Characteristics of an Autonomous Replication Sequence of Cephalosporium acremonium in Yeast = Cephalosporium acremonium의 자율복제 기점의 특성
저자
Lee, Kyoung (Genetic Engineering Research Institute, Korea Institute of Science and Technology) ; Kang, Dae Ook (Genetic Engineering Research Institute, Korea Institute of Science and Technology) ; Yoon, Byung Dae (Genetic Engineering Research Institute, Korea Institute of Science and Technology) ; Hwang, In Kyu (Genetic Engineering Research Institute, Korea Institute of Science and Technology) ; Ahn, Jeong Seog (Genetic Engineering Research Institute, Korea Institute of Science and Technology) ; Mheen, Tae Ick (Genetic Engineering Research Institute, Korea Institute of Science and Technology)
발행기관
학술지명
한국미생물·생명공학회지 (Korean Journal of Microbiology and Biotechnology)
권호사항
발행연도
1991
작성언어
English
주제어
KDC
570.6
등재정보
SCOPUS,KCI등재
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
215-221(7쪽)
제공처
소장기관
YIp5를 사용하여 Cephalosporium acremonium ATCC 2033으로부터 Saccharomyces cerevisiae SHY3에서 발현되는 자율복제 기점(ARS)를 분리하였다. 자율복제 기점을 갖는 40종의 vector 가운데 가장 안정성(stability)이 높은 plasmid를 pCY-2라 명명하였으며, pCY-2는 C. acremonium에서 유래하는 3.7kb의 단편을 갖고 있었다. 또 Southern hybridization과 재형질전환을 통해 pCY-2가 효모내에서 자율적으로 복제되고 있다는 것을 확인하였다. 또한 pCY-2는 형질전환율과 안정성에 있어 효모의 ARS를 갖는 YRp7 vector보다 우수하였다.
이와 같은 성질은 2.6kb의 DNA 단편내에는 두 자율복제 기점이 공존하기 때문으로 추측되어졌다. 그리고 pCY-2는 근접해 공존하는 두 복제 기점의 연구에 중요한 재료가 되리라 추측된다.
An autonomous replication sequence(ARS) derived from Cephalosporium acremonium ATCC 20339 was cloned in Saccharomyces cerevisiae SHY 3 using YIp5 as a cloning vector. A new recombinant plasmid, designated pCY-2, which contained a 3.7kb BamHI fragment of C. acremonium DNA showed the highest stability among the 40 recombinant plasmids composed of the YIp5 and ARS of C. acremonium. Also, Southern hybridization and transformation of E. coli with DNA purified from yeast transformants verified that pCY-2 autonomously replicates in yeasts. Transformation efficiency and plasmid stability of pCY-2 in yeast were higher than those of YRp 7 containing ARS which originated from yeast. Detailed studies by subcloning revealed that two ARSs existed within 2.6kb of the insert, which is a novel discovery. However, it was concluded that these two ARSs were ligated during the gene manipulation in vitro.
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