KCI등재
SCOPUS
여성 생식기에서 난포자극 호르몬 수용체 mRNA의 발현 = Expression of FSHR mRNA in female genital organs
저자
김장흡 (가톨릭대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 김진홍 (가톨릭대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 류진희 (가톨릭대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 김은중 (가톨릭대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 류순원 (가톨릭대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 정미영 (가톨릭대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 손화정 (가톨릭대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 류기성 (가톨릭대학교 의과대학 산부인과학교실) ; 차정호 (가톨릭대학교 의과대학 해부학교실)
발행기관
학술지명
Obstetrics & Gynecology Science(Obstetrics & Gynecology Science)
권호사항
발행연도
2002
작성언어
Korean
주제어
KDC
516
등재정보
KCI등재,SCOPUS,ESCI
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
575-582(8쪽)
제공처
난포의 성장과 배란에 중추적 기능을 하는 뇌하수체 호르몬인 FSH는 G 단백 결합 수용체군에 속하는 FSHR과 결합하여 작용한다. 일반적으로 FSH의 유일한 표적기관은 난소이고 FSHR 유전자 역시 난소에서만 발현된다고 알려져 왔으나 최근 실험 동물에서 난소 외 조직내 FSHR 유전자 발현이 보고되었으며 폐경기 여성의 암발생과도 연관이 있다는 주장이 제기되었다. 따라서 저자들은 인간의 여성 생식기 조직에서의 FSHR 발현 유무를 규명하고 그 의의를 알아보고자 본 연구를 계획하였다.
실험은 정상 월경주기의 난포기에 있는 5명의 여성을 대상으로 난소, 난관, 자궁 체부, 자궁 경부 조직과 함께 혈액을 채취하였다. FSHR mRNA의 발현은 in situ hybridization과 QC RT-PCR을 이용하여 연구하였다. In situ hybridization은 cloning된 FSHR의 DNA를 이용하여 digoxigenin이 부착된 약 800 bp의 RNA probe를 제작하고 파라핀 포매된 절편에서 시행하였다. QC RT-PCR은 primer를 제작하여 (antisense: 5’-GGCCCTGCTCCTGGTCTCTTTG-3’, sense: 3’-AACAGCGGGAGTACCTTCGG-5’) 799 bp의 PCR 산물을 생성토록 하였고, 목적 유전자와 경쟁적으로 작용하는 149 bp가 결실된 DNA competitor를 제작한 후 목적 유전자와 함께 PCR하여 RNA 발현량을 비교 정량하였다.
In situ hybridization상 난소 조직에서는 (5예) 일차 난포에서부터 난포의 크기에 비례하여 FSHR mRNA 발현강도가 강해졌으나, 원시난포에서는 전혀 염색되지 않았으며, 난포가 성숙난포로 성장하면서 발현이 더욱 증가하였다. 난관 조직에서는 5예 모두에서 난관의 상피세포에서만 염색되는 소견을 보였고, 자궁 내막, 자궁 근층 및 자궁 경부 조직에서는 모두 발현되지 않았다. QC RT-PCR로 정량한 FSHR mRNA의 평균 발현량은 난소에서 840.00±516.29, 난관에서 240.00±154.91, 자궁 체부에서 6.06±4.13, 자궁 경부에서 5.48±5.00 fg이었다.
본 연구를 통하여 FSHR mRNA는 인간의 난소와 난관 상피에서 주로 발현되었지만 자궁 체부와 자궁 경부 조직에서도 소량의 발현이 관찰되었다. 난소외 여성 생식기에서의 FSHR 유전자 발현의 의의와 그 기능적 역할을 규명하기 위하여 더 많은 연구가 필요하며, 본 연구를 토대로 여성 생식기에서 FSH의 정확한 생리적 기능을 알 수 있을 뿐아니라 나아가서 폐경이후 양성 및 악성 종양화 과정과의 연관성도 밝힐 수 있으리라 사료된다.
FSH is the pivotal hormone in the regulation of ovarian function and acts by binding to specific receptor, FSH receptor (FSHR), which is belong to the family of G-protein coupled receptor. It have been considered that ovary is the only target organ of FSH because FSHR mRNA was first detected in ovarian follicles. However expression of FSHR mRNA was also detected on fallopian tube in experimental animal study and it is related wih tumorigenesis in postmenopausal women.
In this study, in order to understand the FSH function in female genital organs, the ontogeny of the production profile of FSHR and the pattern of its localization in female genital organs were studied. We obtained the fresh tissues of ovary, fallopian tube, uterine body and uterine cervix with blood samples during proliferative phase in women with regular menstrual cycle. To establish FSHR mRNA expression of human internal genital organ, we studied by using in situ hybridization and quantitative competitive reverse transcription polymerase chain reaction (QC RT-PCR). To localize FSHR transcripts by in situ hybridization, we synthesized digoxigenin-labelled ssRNA probe (about 800 bp) from the cloned FSHR cDNA. For QC RT-PCR, we designed oligonucleotide primers (antisense: 5’-GGCCCTGCTCCTGGTCTCTTTG-3’, sense: 3’-AACAGCGGGAGTACCTTCGG-5’) which produced 799 bp sized PCR products. Simultaneously we synthesized 149 bp deleted DNA competitor by site-directed mutagenesis to quantify target FSHR mRNA expression comparing as internal control.
In situ hybridization with digoxigenin-labelled ssRNA probe showed no signal above the background in primordial follicles. FSHR mRNA was first detected in the single layer of cuboidal granulosa cells surrounding primary follicles. As follicular growth progressed, FSHR mRNA expression increased gradually in antral and graafian follicles. Similary, in fallopian tube, the epithelium stained intensly. But FSHR mRNA expression was absent in uterine body including endometrium and myometrium and uterine cervix. Total RNA was extracted and quantitated by QC RT-PCR. The amounts of FSHR transcript measured were 840.00± 516.29 in the ovarian tissue, 240.00±154.91 in the fallopian tube, 6.06±4.13 in the uterine body, 5.48±5.00 fg in the uterine cervix. These experiments demonstrated that FSHR mRNA is expressed in the ovary and fallopian tube, albeit only small amount was expressed in uterine body and cervix.
In conclusion, the presence of FSHR mRNA in female internal genital organ with site specific pattern suggested that FSH may have some role in female genital organs during the adult reproductive cycle and may act as an factor in the tumorigenesis. Further study about the functional role and tumorigenesis of FSH should be performed in human internal genital organ.
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