Membrane Transporter Genes in Cephabacin Biosynthetic Gene Cluster of Lysobacter lactamgenus = Lysobacter lactamgenus의 Cephabacin 생합성 유전자 뭉치내에 있는 막 수송 유전자
저자
NAM, DOO HYUN (College of Pharmacy,Yeungnam University) ; LIM, SI KYU (Institute of Biotechnology, Yeungnam University) ; CHUNG, MIN HO (Institute of Biotechnology, Yeungnam University) ; LEE, EUNG SEOK (College of Pharmacy, Yeungnam University) ; SOHN, YOUNG SUN (Institute of Biotechnology, Yeungnam University) ; RYU, DEWEY D. Y. (Biochemical Engineering Program, University of California)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
2001
작성언어
English
주제어
KDC
518.000
자료형태
학술저널
수록면
139-148(10쪽)
제공처
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In order to clone the peptide syntherase gene from Lysobacter lactamgenus IFO 41,288. the gene fragments were amplified using primers for the adenylation domain and the thionylation domain of the peptide synthetase genes in other organisms by polymerase chain reaction (PCR). The resulting 0.5-kb fragment was cloned in a pGEM-T vector, and the nucleotide sequences were determined. Six different PCR products were obtained; three were identified to be a part of L-∝-aminoadipyl-L-cysteinyl-D-valine (ACV) synthetase and three to be other peptide synthetases. Using each of the two different classes of PCR products as mixed probes, a cosmid library of L lactamgenus chromosomal DNA constructed in a pHC79 vector was screened by an in situ hybridization procedure, and one positive clone was selected which was bound by peptide synthetase gene fragments as well as ACV synthetase gene fragments. The partial sequence analysis from the obtained pPTS-5 cosmid showed the presence of more than two open reading frames. These were for two putative membrane transporters, which were homologous with several integral membrane proteins including the ABC transporter ATP-binding protein of E. coli (UbjZ)and the metal ion uptake protein of Bacillus subilis (YvrN). A45% homology was also found between the two transporter proteins at the carboxy terminus. Through a hydropathy analysis and transmembrane analysis, 4-5 transmembrane domains were found in these two proteins. When the genes were expressed in Escherichia coli, the gene products inhibited the host cell growth, probably due to the disturbance of the membrane transport system.
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