인체 조직의 면역조직화학 염색에서 고정방법의 연구 = Studies on the fixative method in immunohistochemistry staining of human tissues

국문 초록 (Abstract)

면역조직화학 염색은 조직검사나 세포검사 등의 진단을 위하여 많이 사용하고 있는데, 이때 조직의 고정을 위하여 사용하는 고정액에 따라 염색의 양상이 달라진다. 따라서 본 실험에서는 우수한 고정액을 선정하기 위하여 일반적으로 널리 이용하고 있는 고정액인 formalin과 alcohol, acetone 및 methacarn을 이용하여 대장 조직을 고정한 경우의 염색 양상을 비교하였다.
Hematoxyline & eosin(H&E)의 기본 염색에서는 formalin 고정액이 alcohol, acetone 및 methacarn 고정액 보다 우수하게 나타났다. 면역조직화학 염색인 labbled streptoavidin-biotin(LSAB) method에 의한 항원의 발현 양상을 비교한 경우 formalin에서 inducible nitric oxide synthase(i-NOS)와 transforming growth factor-β1(TGF-β1), transforming growth factor-β3(TGF-β3)의 염색은 강하게 되었으나 background도 강한 염색을 동반하였다. Alcohol과 methacarn의 경우 종양세포와 background에서 i-NOS와 TGF-β1, hypoxia-inducible factor-1α(HIF-1α)는 약하게 염색이 되거나 잘되지 않았으며, TGF-β3는 강하게 되었으나 background도 강한 염색을 동반하였다. 반면에 acetone의 경우 i-NOS와 TGF-β1에서 비교적 염색이 잘 되었다.
결론적으로 조직의 고정에 사용하는 고정액의 종류에 따라 항원들의 면역조직화학 염색의 양상이 많이 달라질 수 있다는 사실을 확인 할 수 있었다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

The immunohistochemical staining was generally used for histologic and cytologic diagnosis. The quality of staining could be varied a fixative solution. Therefore, a study was carried out to confirm the quality of immunohistochemical stainning using various fixative solutions such is formalin, alcohol, acetone and methacarn.
Formalin was the most favorable fixative solution than that of the others for routine H&E stainning. In immunohistochemical staining of i-NOS and TGF-β1 using LSAB method, the staining characteristics with various fixatives were as follows. In case of formalin solution, i-NOS and TGF-β1, TGF-β3 expression were strong staining with background staining pattern. In case of acetone solution, i-NOS and TGF-β1 expression were also strong without background staining but alcohol and methacarn, were weak staining. However, most of fixatives were not suitable for HIF-lα and TGF-β3, HIF-lα staining and it is difficult to interpret positive results of TGF-β3 because of strong background staining. In conclusion, the patterns of immunohistochemical staining were influenced by various fixative solution.

목차 (Table of Contents)

• 감사의 글 = ⅰ
• 국문요약 = ⅱ
• 목차 = ⅲ
• 표목록 (List of Tables) = ⅳ
• 그림목록 (List of Figures) = ⅴ
• 약어요약 = ⅵ
• 서론 = 1
• 실험재료 및 방법 = 6
• 1. 실험 재료 = 6
• 2. 실험 방법 = 6
• 1) Hematoxyline & eosin method (H&E method) = 7
• 2) Labbled streptoavidin-biotin method (LSAB mehtod) = 8
• 결과 = 9
• 고찰 = 21
• 참고문헌 = 26
• Abstract = 35