전신성 홍반성 낭창 환자에서 Natural Killer 세포와Natural Killer T 세포의 분포와 기능에 관한 연구 = The Number of NKT and NK Cells in Patients with Systemic Lupus Erythematosus is Decreased:Associationwith the Pathogenesis for SLE

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

Background:Systemic lupus erythematosus (SLE) is one of chronic autoimmune diseases of which the central pathophysiologic derangement has not been yet established. Recently, it has been suggested that immune-regulatory cells might affect the development of autoimmune diseases such as SLE and RA. NKT cells were reported to be strong candidate for regulatory cells to regulate immune responses in vivo. To elucidate the roles of immune regulatory cells in the pathogenesis of SLE, we investigated the fractional distribution and functional status of NK and NKT cells in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of SLE patients and healthy volunteers.
Methods:Twenty-two SLE patients and 18 age- matched healthy volunteers were included in this study. The analysis for NK and NKT cells fraction in PBMCs of patients and normal controls were performed by flow cytometric analysis. In addition, to explore the functional status of these cells in SLE patients, we stimulated PBMCs using phorbol ester and ionomycin and measured cytoplasmic IL-4 and IFN-γ by flow cytometry.
Results:The number (percentage) of NK cells was lower in SLE patients (CD3－CD56＋:4.93±1.30%, CD3－CD94＋:4.03±1.00%) than in controls (11.28±1.77%, 8.15±1.40%; p<0.01, respectively). Peripheral NK cell numbers negatively correlated with anti- dsDNA Ab levels (r=-0.431, p<0.05) and ESR (r= -0.475, p<0.05). However, the percentage of these cells was not correlated with renal activity or corticosteroid doses. SLE patients showed, compared with controls, significantly decreased numbers of NKT cells (CD3＋CD56＋:1.79±0.42% vs 5.04±0.44%, CD3＋CD94＋:1.21±0.27% vs 4.39±0.45%; p<0.01, respectively). The cytoplasmic expression of IL-4 and IFN-γ in NK and NKT cells of SLE patients stimulated using phorbol ester and ionomycin were almost similar to those of normal controls, suggesting the NKT cells from SLE patients are functionally intact.
Conclusion:Our results suggested that the decreased numbers of immune regulatory cells were associated with the immune dysregulation of SLE patients. The cellular replacement of NKT cells may be one of useful therapeutic approaches for autoimmune diseases such as SLE.

국문 초록 (Abstract)

목 적:T 세포 중 표지자인 NK1.1 단백을 표현하는 T 세포를 NKT 세포라고 한다. 이 NKT 세포의 기능에 대하여 정확하게 밝혀지지는 않았지만 최근 들어서 생체 내에서 면역학적 반응을 조절하는 기능을 지니고 있다고 알려지고, 이에 대한 연구가 진행되고 있다. 저자들은 전신성 홍반성 낭창 (SLE)의 발병에 관여하는 NKT 세포의 면역조절기능을 알아보기 위해 말초혈액 내 NK, NKT 세포의 분포와 외부자극에 대한 NKT 세포들의 기능을 평가하고자 본 연구를 수행하였다.
방 법:SLE 환자 22명과 정상 대조군 18명을 대상으로 NK 표지자 (CD56, CD94)와 T 세포 표지자 (CD3)를 이용한 유세포 분석을 통해 NK와 NKT 세포의 말초혈액 내 분포를 확인하고 이를 질환의 임상지표와 비교하였다. SLE 환자와 정상 대조군의 NKT 세포 기능은 PMA와 ionomycin 자극에 대한 NKT 세포 내의 cytokine (IL-4, IFN-γ)의 발현으로 비교하였다.
결 과:SLE 환자와 정상 대조군을 대상으로 말초혈액 내 NK 세포와 NKT 세포의 수적변화를 비교하였을 때 SLE 환자의 말초혈액 내 NK 세포 (CD3－/CD56＋ 4.93±1.30%; CD3－/ CD94＋ 4.03±1.00%)는 정상 대조군 (CD3－/CD56＋ 11.28±1.77%; CD3－/CD94＋ 8.15±1.40 %)에 비해 감소되어 있었으며 (p<0.01), NKT 세포 또한 SLE군이 대조군에 비해 유의하게 감소되어 있었다 (CD3＋/CD56＋; 1.79±0.42 vs 5.04±0.44%:CD3＋/CD94＋; 1.21±0.27 vs 4.39±0.45%, p<0.01). NK 세포의 수적변화와 SLE 환자의 임상상과의 연관성을 분석하였을 때 항 ds-DNA 항체가의 증가, ESR의 증가와 C4의 감소와 유의한 연관성을 보였으나 (p< 0.05), 신질환의 활동성과는 상관관계를 보이지 않았다. 말초 혈액을 분리, 자극한 후 NK 및 NKT 세포 내 IL-4, IFN-γ를 측정하였을 때, 발현정도는 SLE 환자 (n=6)와 정상 대조군 (n=6) 사이에 유의한 차이가 없었다.
결 론:SLE 환자에서 면역조절 세포의 일부인 NKT 세포의 수적인 감소는 NKT 세포가 SLE 병인에 밀접한 관계가 있음을 시사한다. 하지만 감소된 NKT 세포의 기능은 정상으로 유지되고 있는 점으로 보아 SLE 환자에서 NKT 세포의 기능적 결함보다는 NKT 세포의 단순한 수의 감소에 의한 면역조절능의 감소가 SLE의 병의 발병 및 경과에 영향을 미칠 것으로 판단된다.