곤충병원균 Bacillus thuringiensis의 분리 동정과 면역학적 분류의 적용에 관한 연구 = Isolation and Identification of Entomopathogenous Bacteria, Bacillus thuringiensis and Attempt to Application of Serotaxonomic Methods
저자
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1991
작성언어
Korean
KDC
404
자료형태
학술저널
수록면
163-180(18쪽)
제공처
소장기관
1989년부터 1991년까지 충청북도 9개 지소와 경상북도 4개 지소로 부터 누에의 사체, 배설물, 잠사주위의 토양으로 부터 Bacillus thuringiensis 분리를 시도하였다. 분리균주는 형태적, 생리적 특징에 따라 분류, 동정되었으며, 이들 야생 분리균주의 serological classification을 위하여 표준균주를 사용한 crossed immunoelectrophoresis결과 야생 분류쥰주의 분류 및 동정에 serological technique의 적용을 가능하게 해 주었다.
1. 실험에 사용된 분리균주 13개중 parasporal crystal을 갖고있는 균주는 6개였다. 이들 6개균주는 모두 V-P반응, nitrate의 환원반응, glucose, ribose, fructose로 부터의 산의 생성반응 amylase 생성 및 protease 생성반응에서 양성반응을 보였으며, citrate 이용, P2S생성 및 indol 생성반응에서는 negative반응을 나타내어 B. thuringiensis인 것으로 판단된다.
2. 분리균주 CK-13와 CG-3은 urease생성반응에서 양성을, mannose와 sucrose로 부터의 산의 생성반응에서는 음성을 나타내서 B. thurigiensis var. galleriae, var. kennyae 또는 var. kurstaki로 판단된다.
3. 분리균주 DJ-9와 GS-34는 urease생성반응과 mannose와 sucrose로 부터의 산의 생성반응에서 음성을 보였으며 cellobiose로 부터의 산의 생성 실험에서는 양성을 보여 var. dendrolimus로 판단된다.
4. 분리균주 SC-4는 urease를 생성하지 않고 mannose로 부터는 산을 생성하나 sucrose로 부터는 산을 생성하지 않아 var. kyuskuenis 또는 var. ostriniae로 판단된다.
5. 분리균주 CG-3는 urease를 생성하지 않고 mannose로 부터는 산을 생성하지 않으나 sucrose로 부터는 산을 생성하여 var. parkistani, var. tolworthi, var. canadensis로 판단된다.
6. Bacillus thuringiensis 표준균주의 crossed immunoelectrophoresis 결과 각 균주는 1차원 전기영동에서의 각 항우너의 Rf1 값이 상이하였다. var. tohokuensis와
Isolation of the entomopathogenic bacteria, Bacillus thuringiensis, from the 13 areas of Chungcheongbuk-do and Kyungsangbuk-do, and the introduction of immunoelectrophoretic technique using standard B. thuringiensis strains were carried out for three years, from 1989 to 1991.
The dead body and feaces of Bombyx mori and the soil around the silkworm-rising room were used as samples of isolation of B. thuringiensis. Each bacterial isolates from the samples were identified based on the morphological and physiological characteristics. Among the isolates, 6 bacterial strains were Bacillus thuringiensis which had parasporal crystal and showed gram positive. These 6 isolates also showed positive of V-P reaction, reduction of nitrate reaction, acid production from glucose, ribose, and fructose, and negative of H2S production and indol production. Strain CK-12 and CG-3 showed the same physiological characteristics, positive urease production, negative acid production from mannose and sucrose, therefore, expected to var. galleriae or var. kennyae or var. kurstaki. Strain DJ-9 and GS-34 expected to var. dendrolimus because showed negative urease production and acid production from mannose and sucrose, positive acid production from cellobiose. Strain SC-4 was expected to var. kyushuensis or var. ostrinae, and GC-3 was to var. parkistani, or var. tolworthi or var. canadensis, respectively.
And in the experiment which was introduction of the immunoelectrophoretic method to determine the serotype and immunological classification of isolated B. thuringiensis strains, six standard strains of B. thuringiensis var. darmstadiensis, var. sotto, var. tohokuensis, var. tochigiensis, var. wuhanensis, and var. yunnanensis were used in crossed immunoelectrophoresis. Each strain have different Rf1(relative flow rate of each antigen in 1st dimensional electrophoresis) and peaks height of precipitation lines. Using these Rf1 values in each strain, the similarity or immunological distance(ID) was calculated. ID between var. wuhanensis and var.tochigiensis was the shortest, and between var. tohokuensis and var. yunnanensis, between var. wuhanensis and var. yunnanensis were the farthest.
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