Molecular Cloning of ATPase α-subunit gene from mitochondria of Korean ginseng(Panax ginseng C.A. Meyer) = 고려인삼(Panax ginseng C. A. Meyer) ATPase α-subunit 유전자의 Cloning
저자
Park, Ui Sun (Dept. of Agricultural Biology, Chungnam National Univ. ) ; Choi, Kwan Sam (Dept. of Agricultural Biology, Chungnam National Univ. ) ; Kim, Kab-Sig (Dept. of Genetics and Physiology, Korea Ginseng and Tobacco Research Institute) ; Kim, Nam Won (Dept. of Genetics and Physiology, Korea Ginseng and Tobacco Research Institute) ; Choi, Kwang-Tae (Dept. of Genetics and Physiology, Korea Ginseng and Tobacco Research Institute)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1996
작성언어
English
주제어
KDC
472.000
자료형태
학술저널
수록면
89-102(14쪽)
제공처
미트콘드리아내 유전자는 염기서열 재배치에 의해 단일 또는 여러 copy로 존재하는데 그 발현정도에 따라 생리적 특이 현상을 나타낼 것으로 생각되어 세포질 유전의 웅성불임현상에 대한 연구가 활발히 이루어져 왔다. 반음지성이며 생육이 느린 고려인삼(Panaxginseng C. A. Meye)의 특성을 유전자 수준에서 접근하기 위해 F_1ATPase α-subunit 유전자(aptA에 대해 실험하였다.
고려인삼에는 atpA 유전자가 미토콘드리아 DNA에 단일 copy로 존재함을 확인하였으며, 미토콘드리아 DNA의 SalI 및 PstI 유전자은행으로부터 Oenothera atpA유전자와 homology를 보이는 clony을 clone lift hybridization에 의해 선발하였는데, 각각 3.4 kb와 13 kb의 미토콘드리아 DNA조각을 함유하고 있었다. 이 Sal I clone과 Pst I clone에 대해 Southern blot hybridization과 부분적인 염기서열분석을 실시한 결과, 삽입된 3.4 kb와 13 kb의 미토콘드리아 DNA조각은 Oenothera, maize, pea, Phaseolus vulgaris의 atpA유전자와 homology를 보이는 sequence를 포함하고 있었다. 타 식물의 atpA 유전자의 coding sequence와 비교해 볼때, Sal I clone은 initiation codon으로부터 약 300 bp를 제외한 atpA유전자의 나머지 약 1.2 kb sequence를 포함하고 있고, Pst I clone은 atpA유전자의 완전한 coding sequence를 포함하고 있는 것으로 여겨진다. 이들 두 clone의 제한효소 지도와 부분적인 염기서열이 제시되었다. 고려인삼은 단일 copy의 atpA유전자를 갖고있기 때문에 이 타 식물에서와 같이 복잡한 유전자 재배치에 따른 생리적 불균형의 가능성은 없는 것으로 사료된다.
Molecular cloning and restriction mapping on ATPase α-subunit gene (atpA) were carried out to obtain genomic information concerned with the gene structure and organization in Korean ginseng mitochondria.
Two different clones containing the homologous sequence of atpA gene were selected from SalI and PstI libraries of mitochondrial DNA (mtDNA) of Korean ginseng. The sizes of mtDNA fragments inserted in SalI and PstI clones were 3.4 kb and 13 kb, respectively. Southern blot analysis with [^32P]labelled Oenothera atpA gene probe showed that atpA gene sequence was located in 2.0 kb XbaI fragment in PstI clone and in 1.7 kb XbaI fragment in SalI clone. A partial sequencing ascertained that the SalI clone included about 1.2 kb fragment from SalI restriction site to C-terminal sequence of this gene but about 0.3 kb N-terminal sequence of open reading frame was abscent. The PstI fragment was enough large to cover the full sequence of atpA gene. The same restriction pattern of the overlapped region suggests that both clones include the same fragment of atpA locus. Date of Southern blot analysis and partial nucleotide sequencing suggested that mtDNA of Korean ginseng has a single copy atpA gene.
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