임상분리 Methicillin Resistant Staphylococcus aureus에 대한 항균활성 시너지 효과 = Synergistic Antibacterial Activity against Clinical Isolates of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus
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2017
작성언어
Korean
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자료형태
학술저널
수록면
11-18(8쪽)
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최근 병원 감염의 주 원인균이며 기존 항생제에 다제내성을 보이는 MRSA(Methicillin Resistant Staphylococcus aureus)가 문제가 되고 있다. 다제내성균에 대한 치료제로 vancomycin이나 teicoplanin이 사용되고 있으나 그 사용이 아주 제한적이며, 최근에는 이들 항생제에 대한 내성균주가 많이 출현하여 새로운 항생제 개발이 절실히 요구되고 있다. 따라서 본 연구에서는 해양 미생물에서 분리한 항MRSA 활성을 나타내는 YJ-1 균주의 최적배양 조건을 확립하고, 이 균주가 생산하는 항균활성물질을 분리, 정제하여 신규 항생제제로서의 가능성을 제시하고자 하였다.
울진에서 해수를 sampling한 후 가장 강력한 anti-MRSA 활성을 나타내는 YJ-1 균주를 선택하여 분류, 동정하여 Pseudomonas sp. YJ-1으로명명하였다. 본 균주의 최적 성장 온도는 25℃였으며, 20℃와 30℃에서 성장에 큰 차이는 없었으며, 10℃와 4℃에서는 거의 성장하지 못 하였다. 최적 pH는 7.0으로 나타났으며, pH 6.0-9.0 사이에서 비교적 양호한 성장을 보였고, pH 4.0과 10.0에서는 거의 성장하지 못 하였다. 최적 NaCl 농도는 1%에서 가장 높게 나타났지만 NaCl 0% 농도에서와 큰 차이는 없었고, 3.0%까지 양호한 성장률을 보였으나 염농도가 높을수록 점점 성장률이 낮아지다가 염농도 7.0 이상에서는 거의 성장하지 못 하였다. 각종 유기용매 추출, C18 ODS open column, silica gel chromatography, reverse-phase HPLC 등을 이용하여 anti-MRSA 활성을 나타내는 순수 물질을 얻었으며, 이 중 MR1 물질은 임상분리 MRSA 균주인 DA 12와 DA 16 균주에 대해서도 비교적 우수한 활성을 나타내었다. MR1 물질을 농도별, 시간별로 DA 12와 DA 16 균주에 접종하여 항균활성을 비교한 결과, MR1은 vancomycin과 비슷하거나 오히려 높은 항균활성을 나타내어 MRSA에 대한 새로운 항생제 개발의 가능성을 제시 할 것으로 판단된다. 또한 MR1과 vancomycin과 함께 처리했을 때의 항MRSA의 시너지 효과를 조사한 결과, 임상분리 균주인 DA 12와 DA 16에 대해서 모두 우수한 시너지 효과를 나타내었다.
이상의 결과 향후 YJ-1으로부터 정제한 최종 물질의 화학적 특성과 구조를 규명하고, 작용기작을 밝힌다면 차세대 항생제로서의 개발 가능성이 높을 것으로 판단된다.
It was isolated marine bacterium, isolate YJ-1 which produced a bactericidal antibiotics against MRSA. This isolate YJ-1 was identified to the genus Pseudomonas and was designated Pseudomonas sp. YJ-1. Pseudomonas sp. YJ-1 relatively grows well in the 25℃, pH 7.0, NaCl 1.0 %. For the purification of the bioactive compounds, YJ-1 was fermented in 37 L PPES-Ⅱ medium, and culture filtrates of YJ-1 was extracted by ethyl acetate, hexane, and 80% MeOH. The 80% MeOH fraction was separated by C18 ODS open column, silica gel chromatography and reverse phase HPLC to yield three anti-MRSA agent, MR1 compound. Compared with vancomycin and ampicillin, the MR1 has the potent activity against MRSA. In addition, the combination of MR1 compound with vancomycin produced a more rapid decrease in the clinical isolates, DA 12 and DA 16 MRSA cells than MR1 compound alone. Taken together, our results suggest that Pseudomonas sp. YJ-1 and its anti-MRSA compound could be employed as a natural antibacterial agent in MRSA infection.
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