SCOPUS
KCI등재
Bacillus stearothermophilus β-D-Xylosidase 유전자의 크로닝 및 Escherichia coli에서의 발현 = Molecular Cloning and Expression of Bacillus stearothermophilus β-D-Xylosidase Gene in E. coli
저자
오세욱 (고려대학교 자연자원대학 유전공학과) ; 박성수 (고려대학교 자연자원대학 유전공학과) ; 박영인 (고려대학교 자연자원대학 유전공학과) ; 최용진 (고려대학교 자연자원대학 유전공학과)
발행기관
학술지명
한국미생물·생명공학회지 (Korean Journal of Microbiology and Biotechnology)
권호사항
발행연도
1992
작성언어
Korean
주제어
KDC
570.6
등재정보
SCOPUS,KCI등재
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
136-142(7쪽)
제공처
소장기관
토양 분리균인 B. stearothermophilus chromosome의 유전자 은행으로부터 E. coli HB101 균주에 β-D-xylosidase 생산능력을 갖게하는 5.4 kb와 6.4 kb의 두 DNA 절편을 분리, pBR322에 크로닝하여 각각 pMG01과 pMG02의 재조합 플라스미드를 얻었다. 상기 두
B. stearothermophilus DNA 절편의 restriction map을 작성하고 이것을 기초로 하여 β-D-xylosidase 유전인자의 위치를 확인함과 동시에 pUC18에 subcloning하여 각각 2.2kb와 1.Okb의 DNA 단편이 삽입된 β-D-xylosidase 양성의 pMGl와 pMG2를 분리하였다. 상기 두 β-D-xylosidase 유전인자는 Southern blotting에 의해서 B. stearothermophils에서 유래된 서로 다른 별개의 유전인자임을 확인할 수 있었다. 또한 두 β-D-xylosidase는 다같이 xylobiose, xylotriose, xylotetrose 및 xylopentose를 효율적으로 분해, 주 분해산물로서 다량의 xylose를 생산하였으며, 특히 pMGl 플라스미드상의 β-D-xylosidase 유전인자는 β-D-xylosidase 활성 뿐만 아니라 α-L-arabinofuranosidase 활성도 함께 가지고 있는 bifunctional protein으로 추측되었다.
Bacillus stearothermophilus isolated from soil was identified to express multiple extracellular xylanases. Two HindⅢ restriction fragments of 5.4 and 6.4 kb from B. stearothermophilus genomic DNA were cloned into pBR322 to obtain recombinant plasmids pMG01 and pMG02, respectively, which enabled E. coli HB101 cells to produce β-D-xylosidase activity. By subcloning into pUC18 and Southern blotting, the loci of the β-D-xylosidase genes were elucidated to be on non-homologous DNA fragments of 2.2kb from pMG01(pMGl) and 1.0kb from PMG02(pMG2), respectively. The two enzymes produced in E. coli cleaved xylobiose, xylotriose, xylotetrose and xylotetrose to produce xylose as a major end product. The gene
on pMGl, distinct from that on pMG2 was observed to encode a bifunctional protein that displayed both β-D-xylosidase (EC.3.2.1.37) and α-L-arabinofuranosidase activities(EC.3.2.1.55).
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