Amber suppression reporter를 이용한 orthogonal suppressor tRNA 및 aminoacyl-tRNA synthetase 발현벡터의 선별
저자
발행기관
한국외국어대학교 외국학종합연구센터 부설 기초과학연구소(Institute of Basic Sciences Center for Foreign Studies)
학술지명
권호사항
발행연도
2004
작성언어
Korean
KDC
405.000
자료형태
학술저널
수록면
39-46(8쪽)
제공처
세포 내에서 단백질 합성시 특정 위치에 비천연 아미노산을 삽입하는 방법으로 orthogonal suppressor tRNA와 이를 인지하는 aminoacyl-tRNA synthetase 쌍이 활용되고 있다. 하지만 일반적으로 orthogonal pair가 돌연변이 또는 다른 종으로부터 차입되는 분자임으로 사용하고자 하는 세포 내에서 활성을 갖는지를 확인하는 것은 필수적이다. 또한 suppressor tRNA/ aminoacyl tRhA-synthetase의 비가 amber suppression의 효율에 커다란 영향을 미친다. 본 논문에서는 amber codon을 가진 lacZ 유전자를 chromosomal DNA 내에 가제고 있는 대장균 DH108(Tn:Zam)을 이용하여, 2개의 suppressor tRNA, S. cerevisiae tRNA^(Tyr) 및 E. coli mutant initiator tRNA, 와 5 종류의 S. cerevisiae TyrRS 발현벡터에 대하여 in vivo amber suppression 활성을 비교하여 가장 적합한 orthogonal pair를 선별하였다.
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