MDCK 세포에서 Hantaan Virus의 증식에 관한 연구 = Studies on the Propagation of Hantaan VIrus 76-118 in MDCK Cell Cultures
저자
정상인 (중앙대학교 의과대학 미생물학교실)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1989
작성언어
Korean
KDC
510
자료형태
학술저널
수록면
131-145(15쪽)
제공처
This study was intended to establish the susceptibility of Madin and Darby Canine Kidney (MDCK) cells for the propagation of Hantaan virus and to evaluate the applicability of MDCK cell system for the measurement of fluorescent antibody titers in sera from patient with Hemorrhagic fever with renal syndrome (HFRS). Through the experiments, observations were made with development of specific fluorescent antigen in MDCK cells following inoculation with Hantaan virus, blocking of appearance of such a specific fluorescent antigen in MDCK cells when Hantaan virus was pretreated either with convalescent patient's serum or immune rat serum, comparison of growth patterns of Hantaan virus in MDCK, A-549 and Vero E6 cells, demonstration of characteristic 3 segments of single-stranded viral RNA in Hatitaan virus incoulated MDCK cells and finally, applicability of MDCK cell system of the titration of fluorescent antibody in convalescent sera from patients with HFRS.
The results are summarized as follows:
1. On 8 day after Hantaan virus inoculation, specific granular fluorescent antigens developed, exclusively in the cytoplasm of MDCK cells when observed by the indirect fluorescent antibody technique. Such fluorescent antigens in MDCK cells were very much similar to those in both Vero E6 and A-549 cells inoculated with the same virus, except that the occurrence of nonspecific fluorescence was far less in MDCK cells.
2. Both the percentages of cells exhibiting specific fluorescence and the intensities of such fluorescence increased significantly through the first and second passage of MDCK cells inoculated with Hantaan virus.
3. Such development of virus-specific cytoplasmic fluorescent antigens in MDCK cells was specifically inhibited by the pretreatment of inoculating virus either with convalescent serum from patients with HFRS or with immune rat serum.
4. The growth pattern of Hantaan virus in MDCK cells was fairly similar to those in Vero E6 cells and A-549 cells. The infectivity titers measured during 2 weeks after virus inoculation were also comparable. The maximum titers attained were 10^3 to 10^4/0.3 ml levels.
5. Existence of viral single-stranded RNA in 3 segmented pieces in MDCK cells infected with Hantaan virus was demonstrated in this study. These three RNA segments in virus-infected MDCK cells proved to be identical with the ones in infected Vero E6 cells.
6. Measurciiients of fluorescent antibody titers in the use of Hantaan virus infected MDCK cells resulted in the comparable titrations of convalescent sera from patients with HFRS. The results of such titrations were in full agreement with those obtained with both A-549 cells and Vero E6 cells inoculted with Hantaan virus.
It was concluded that in addition to A-549 cells and Vero E6 cells, MDCK cell culture proved to be susceptible and sensitive for the propagation of Hantaan virus.
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