일반연제(포스터) : P-31 ; PCR-Direct Sequencing을 이용한 Lamivudine, Adefovir, Entecavir의 HBV 약제내성 빈도 분석

국문 초록 (Abstract)

배경: B형 간염 바이러스(hepatitis B virus, HBV)는 만성 간질환의 주요 원인으로, 우리나라에서는 전체 인구의 약 8%, 전 세계적으로 4억 명 정도가 간염바이러스 보균자로 알려져 있다. 만성B형 간염 치료의 경구용 치료제로 복제를 저해하여 감염력을 약화시키는 라미부딘(lamivudine)이많이 사용되어 왔으나 장기간 복용할 경우 내성바이러스의 출현이 높아 사용에 제한이 있다. 아데포비어(adefovir)는 wild type과 라미부딘 내성 B형 간염 바이러스에 모두 효과적인 약물로 최근에 사용이 증가되고 있다. 또한 초치료로 가장 강력한 항바이러스 제제를 선택해야 하므로 대부분의 가이드라인들은 현재까지 사용 가능한 약제 중 가장 강력한 약제인 엔테카비어(entecavir)를 권장하고 있다. 이에 저자는 HBV 양성 환자를 대상으로 라미부딘(rt80, rt173, rt180, rt181,rt204, rt207)과 아데포비어(rt215, rt236, rt237), 엔테카비어(rt238, rt169, rt184, rt202, rt250)내성과 관련 있는 HBV DNA polymerase 유전자의 돌연변이 빈도를 분석하였다. 방법: (재)네오딘의학연구소에 2010년 1월에서 8월까지 HBV 약제내성 돌연변이 검사가 의뢰된462건의 혈청 검체에서 DNA 추출하고 HBV nested-PCR을 실시한 후, 증폭된 PCR 산물(960bp)을 2% agarose gel에서 전기영동을 하여 확인하였다. 증폭된 PCR 산물은 자동 염기서열분석기를 이용하여 sequencing을 실시한 다음 rt80, rt173, rt180, rt181, rt204, rt207, rt215,rt236, rt237, rt238, rt169, rt184, rt202, rt250 부분의 돌연변이를 조사하고 그 출현 빈도를 구하여 관련성을 보고자 하였다. 결과: 총 462건 중 273건(59.09%)에서 돌연변이가 발견되었다. 전체 돌연변이 중 rtL180M(53.47%)이 가장 많았고, rtM204I(50.18%), rtM204V(34.79%), rtL80I(31.13%), rtV173L(8.79%), rtA181T(4.39%), rtA181V(3.29%), rtV207I(2.19%), 순 이었으며 나머지 rtA238T(1.46%), rtP237H(1.09%), rtN236T(0.73%), rtL180V(0.36%), rtP237T(0.36%)에서는 빈도가 현저히 낮았다. 그리고 rtM204S, rtQ215S, rtN238D, rtI169T, rtT184G, rtS202I, rtM250V 돌연변이는 확인되지 않았다. 돌연변이 중 단일 돌연변이(28.93%)보다 중복 돌연변이(71.06%)의 빈도가 높았으며, 2군데 돌연변이(70.10%), 3군데 돌연변이(28.86%), 4군데 돌연변이(1.03%)로 나타났다. 일반적으로 2~3군데의 돌연변이가 동시에 존재하는 경우가 빈번하게 확인되었다. 고찰: 본 연구에서 1차 약제인 라미부딘 관련 돌연변이가 95.80%, 아데포비어 관련 돌연변이가4.19%인 반면, 엔테카비어 관련 돌연변이는 본 실험에서 확인되지 않았다. 가장 많이 쓰이고 있는 라미부딘 약제 관련 돌연변이가 현저하게 많음을 확인할 수 있었으며 엔테카비어 약제 관련 돌연변이가 나타나지 않는 점으로 미뤄 이 약제에 의한 초치료가 내성면에서 보다 효과적 일 것이라 판단된다. 향후 라미부딘, 아데포비어, 엔테카비어의 약제 내성 관련 돌연변이형과 환자 임상결과의 관련성에 대한 연구가 추가적으로 실시되면 치료 약제의 효율적 선택에 대한 중요한 임상적 참고가 될 것으로 사료된다.