Transformation of Pisum sativum L. var sparkle; A Non Tissue Culture Method = Agrobacterium tumefaciens를 이용한 완두(Pisum sativum L.)의 형질전환
저자
CHOI, Hong Jib (Department of Agronomy, Kyungpook National University) ; PARK, Soon Ki (Department of Agronomy, Kyungpook National University) ; YOON, Young Hwi (Department of Agronomy, Kyungpook National University) ; KIM, Dal Ung (Department of Agronomy, Kyungpook National University)
발행기관
慶北大學校農業科學技術硏究所(INSTITUTE OF AGRICULTURAL SCIENCE & TECHNOLOGY KYUNGPOOK NATIONAL UNIVERSITY)
학술지명
慶北大農學誌(AGRICULTURAL RESEARCH BULLETIN OF KYUNGPOOK NATIONAL UNIVERSITY)
권호사항
발행연도
1993
작성언어
English
주제어
KDC
520.4
자료형태
학술저널
수록면
11-17(7쪽)
제공처
소장기관
완두에 있어서 보다 효율적인 형질전환 방법을 모색하고 형질전환된 개체를 얻고자 본실험을 수행하여 얻어진 결과는 다음과 같다. 형질전환은 발아중인 완두의 생장점(shoot tip)을 제거한 다음 T-DNA내에 GUS gene과 neomycin phosphotransferase Ⅱ gene이 들어있는 binary vector를 가진 Agrobacterium tumefaciens를 생장점을 제거한 부위에 감염시켰다. 감염후 새로 형성된 shoot는 개체당 4∼5개 였으며, 그중 GUS유전자가 발현하는 shoot만을 정상적인 식물체로 분화 시켰다. 감염부위에서 형성된 shoot에서의 GUS유전자의 발현빈도는 10%내외였다. 이들 개체로 부터 genomic DNA를 분리하여 Dot blot hybridization분석 결과 T-DNA가 식물체 내에 존재함을 알수 있었고, 수확한 종자를 발아시켜 Sorthern blot hybridization한 결과 T-DNA가 다음세대로 전달되었음이 확인되었으며 형질전환율은 2%이내였다.
The transfer of genetic material into pea tissue was accomplished by using an avirulent strain of Agrobacterium tumefaciens containing the binary vector. The method used for transformation requires non-tissue culture steps as it involves the inoculation of the site of the shoot removed of germinating seeds. The identification of β-glucuronidase activity in the tissues of ?? pea plants indicates that the plant expressible β-glucuronidase gene, contained the T-DNA region from pLPBO2, had been transferred at least into somatic tissues. Putative transformed ?? pea plants were advanced to produce T₁plants which were also assayed for the presence of the transferred β-glucuronidase gene. The presence of the β-glucuronidase gene in DNAs isolated from T₁plant was demonstrated by DNA gel blot hybridization. This analysis revealed that the transformed plants contained β-glucuronidase gene.
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