균 spheroplast 및 large unilamellar vesicle의 식물 protoplast로의 도입 = Incorporation of bacterial spheroplast and large unilamellar vesicle into plant protoplast

국문 초록 (Abstract)

A. tumefaciens의 식물 protoplast로의 도입을 확인하는 방법으로 방사성 인산(Na_2H^32PO_4)을 함유한 0.8％ nutrient broth에서 증식한 Agrobacterium tumefaciens C58를 사용하여 방사성 spheroplast와 방사성 Ti plasmid encapsulated liposome을 만들어 Danus carota protoplast로의 도입을 시도한 결과 다음과 같은 실험 성적을 얻었다.
1. A. tumefaciens에서 추출한 Ti plasmid를 Reverse Phase Evaporation 법으로 phosphatidyl-choline, stearylamine과 함께 Ti plasmid encapsulated liposome을 제조한 결과 17％의 Ti plasmid가 liposome안으로 편입되었다.
2. 방사성 Ti plasmid encapsulated liposome과 Dacus carota root protoplast를 polyethyleneglycol-Ca^2＋법으로 처리한 결과 introduction frequency는 38％이었다.
3. A. tumefaciens C58의 spheroplast와 Dacus carota root protoplast를 polyethyleneglycol Ca^2＋ 법으로 처리한 결과 introduction frequency가 47.6％였다.
4. 본 연구에서 얻은 실험결과로 부터 liposome법, spheroplast법 모두 Ti plasmid의 식물 protoplast로의 도입은 용이하게 일어나는 것으로 생각된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

It was attempted in the present study to prepare radioactive Ti plasmid to identify the introduction frequency of Ti plasmid encapsulated liposome into Dacus carota root protoplast. Agrobcterium tumefaciens C58 was cultured in 0.8％ nutrient broth containing radioactive phosphoric acid(H_3^32PO_4) and the radioactive Ti plasmid wad isolated.
Radioactive Ti plasmid was encapsulated into phosphatidyl choline-stearylamine liposomes by reverse phase evaporation technique and the encapsulation frequency was found to be about 17％.
Radioactive Ti plasmid encapsulated liposome and Dacus carota root protoplast was treated by polyethyleneglycol Ca^2＋ procedure. The introduction frequency was 38％.
The spheroplast of A. tumefaciens C38 was prepared from the bacteria cultured in 0.8％ nutrient broth containing radioactive phosphoric acid using lysozyme. As much as 47％ of the spheroplast were found to be introduced into Dacus carota protoplast.