몰핀이 신경아세포종 SH-SY5Y 세포에서 Peroxynitrite에 의한 세포고사를 막는 것은 아편양 수용체나 Phosphatidylinositol-3 kinase (PI-3 kinase) 경로의 활성화에 의한 것이 아니다 = Morphine Prevents Peroxynitrite-induced Apoptotic Cell Death of Human Neuroblastoma SH-SY5Y Cells Not Via the Activation of Opioid Receptors and Phosphatidylinositol-3 kinase (PI-3 kinase) Pathway
저자
정영표 (원광대학교 의과대학 마취과학교실 및 미생물학교실) ; 이동렬 (원광대학교 의과대학 마취과학교실 및 미생물학교실) ; 손용 (원광대학교 의과대학 마취과학교실 및 미생물학교실) ; 김태요 (원광대학교 의과대학 마취과학교실 및 미생물학교실) ; 윤재승 (원광대학교 의과대학 마취과학교실 및 미생물학교실) ; 송윤강 (원광대학교 의과대학 마취과학교실 및 미생물학교실) ; 김명선 (원광대학교 의과대학 마취과학교실 및 미생물학교실) ; 박래길 (원광대학교 의과대학 마취과학교실 및 미생물학교실)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1999
작성언어
Korean
주제어
KDC
510.000
자료형태
학술저널
수록면
137-145(9쪽)
제공처
Background: The effect of opioids on nitric oxide (NO)- and peroxynitrite-induced neuronal cell death is largely unknown. In the present study, we examined the effect of morphine on NO- and peroxynitrite-induced cell death using a human neuroblastoma SH-SY5Y cell line, which abundantly expresses μ, δ, k-opioid receptors.
Methods: The cultured cells were pretreated with morphine and exposed to 3-morpholinosydnonimine (SIN-1) that simultaneously generates NO and superoxide, thus possibly forming peroxynitrite. The cell damage was assessed by using MTT assay ana crystal violet staining. Exposure of the cells to SIN-1 for 24 hours induced apoptotic cell death, as evaluated by the occurrence of morphological nuclear changes characteristics of apoptosis using 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) and measurement of pro-apoptotic protease, caspase-3, activity.
Results: Pretreatment of SH-SY5Y with morphine, significantly inhibited the apoptotic cell death in a dose-dependent manner. Morphine also inhibited SIN-1-induced proapoptotic protease, caspase-3, activity in a dose-dependent manner. However, naloxone (20 μM) hardly antagonized the effect of morphine in SIN-1-induced cell death. The selective ligands for opioid receptor subtypes, [D-Ala^2, N-Me-Phe^4, Gly-ol^5]enkephalin (DAMGO, μ-opioid receptor agonist), [D-Pen^2.5]enkephalin (DPDPE, δ-opioid receptor agonist) and U-69593 (k-opioid receptor agonist) at the concentration of 10 μM did not prevent the cell death induced by SIN-1. PI3-kinase inhibitors, Wortmannin and LY294002, did not inhibit the action of morphine on apoptotic cell death. The neuroblastoma cells treated with morphine significantly elevated glutathione levels (GSH).
Conclusions: The present study showed that morphine protected human neuroblastoma cell line, SH-SY45Y, from the peroxynitrite-induced apoptotic cell death through elevated GSH levels. However, it is suggested that the elevation of GSH by morphine is not via the activation of opioid receptors and/or PI3-kinase pathway but via other unknown mechanism.
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