KCI등재
SCOPUS
인간정자의 수정능부여 및 햄스터난자 침투에 영향을 주는 인자들에 관한 연구 = Factors Affecting Human Sperm Capacitation and Penetration of Zona-Free Hamster Ova
저자
발행기관
학술지명
Obstetrics & Gynecology Science(Obstetrics & Gynecology Science)
권호사항
발행연도
1990
작성언어
Korean
KDC
516
등재정보
KCI등재,SCOPUS,ESCI
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
954-975(22쪽)
제공처
소장기관
TEST-yolk buffer를 이용하여 저온(4℃)에서 보존한후 전배양시킨 정자를 투명대를 제거한 햄스터난자에 수정(insemination)시켜 얻어진 난자침투성적을 비교하여, 햄스터난자 침투에 영향을 미치는 인자들과 각 인자들중 최대의 난자침투를 보이는 조건을 규명하고자 본 연구를 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
1. 난자침투지표로 나타낸 햄스터난자 침투분석결과는 정자-난자 배양액 BWW중의 HSA농도, 정자의 전배양에 이용되는 TYB용액중의 배양시간, SPA의 전배양방법에 따라 다르게 나타났으며, 이는 정자의 수정능 부여 및 선단체반응 유도에 대한 효과때문일 것으로 생각된다.
2. 정자-난자 배양액 BWW중의 HSA농도의 변화에 따라 햄스터난자 침투 분석결과가 다르게 나타났으며, 0.3%농도의 HSA이 3.5%농도의 HSA보다 높은 난자침투효과를 나타내었다.
3. 운동성정자를 추출하는 swim-up과정에 사용하는 BWW배양액 중의 HSA농도를 0.3%, 1.0%, 3.5%로 달리 하였을 때 햄스터난자 침투분석 결과는 유의한 차이를 보이지 않았다.
4. TYB용액을 이용한 정자의 전배양에 있어, TYB용액중 42시간 동안 저온보존했던 경우가 18시간동안 저온보존했던 경우에 비해 더 높은 난자침투효과를 나타내었다.
5. TYB용액에서 42시간 동안 저온보존후 전배양하는 SPA방법이, 18시간 동안 BWW용액에서 전배양하는, 기존의 햄스터난자 침투분석에 비해 더 높은 난자침투효과를 나타내었다.
6. 정자의 전배양후 운동성 보존효과는 TYB용액에서 18시간 저온보존한 경우와 42시간 저온보존한 경우간에 유의한 차이가 없었고, TYB용액에서 18시간 전배양한 경우보다 높은 운동성 보존효과를 나타내었다.
7. 신선정자의 일상적 정액척도와 난자침투성적간에는 유의한 상관관계가 없었다.
8. TYB용액 및 BWW용액을 이용하여 각각 전배양한 후의 정자운동성과 난자침투성적 간에는 유의한 상관관계가 없었다.
결론적으로 난자침투에 유의한 영향을 미치는 상기한 인자들중 최대의 난자침투를 보이는 조건들로써 SPA를 시행한다면, 수정직전 정자군중 수정능이 부여된 정자의 비율을 증진시킴으로써 SPA자체의 임상식별력을 향상시킬 수 있을 것으로 사료된다.
The sperm penetration assay is often used as a prognostic test to assess male fertility in vitro, but a consensus has not been achieved on a specific protocol for the assay yet. Moreover, controversy surrounds the assay because of its frequent lack of correlation with male fertilizing capacity, which may be due to low percentage of capacitated sperm resulting from the assay. With the use of low-temperature capacitation(4℃)in TEST-yolk buffer to increase the proportion of acrosome reacted sperm, the ability of human spermatozoa to penetrate zona-free hamster ova was examined, and sources of variability in the assay were investigated. Results obtained from the study demonstrated that the penetration index defined as the number of sperm penetrations per total ova in seminated were increased by an average of 1.7-fold when spermatozoa was capacitated for 42 hours, as compared with 18 hours. Penetration index was also increased by an average of 2.4-fold in the presence of 0.3% human serum albumin compared with 3.5% human serum albumin in Biggers, Whitten, and Whittingham`s(BWW) medium used for sperm-egg incubation. Increasing the albumin concentration in BWW medium used for recovery of motile sperm from 0.3% to 1.0% or 3.5% did not enhance the penetration index. If the variables studied here are consistently controlled, then the assay could be optimized further for sensitivity and negative predicatability, and the assay results might reflect sperm performance more accurately than the traditional assay.
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