양식생물 백신연구 (1545002131) / 2010 / 수산시험연구['09통합] / 권문경 / 국립수산과학원 / 농림수산식품부 / 360,000,000
KCI등재
국가R&D연구논문Development of DNA probe for a protistan parasite of tunicate Halocynthia roretzi
저자
Choi, Dong-Lim ; Hwang, Jee-Youn ; Choi, Hee-Jung ; Hur, Young-Baek
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발행연도
2010
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English
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KCI등재
자료형태
학술저널
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수록면
313-322(10쪽)
제공처
Edible tunicate Halocynthia roretzi, one of the most commercially important aquatic organisms in Korea, has been killed by tunic softness syndrome since last decade. The intracellular protistan parasite observed by the transmission electron microscope in hemocytes of the tunicate was considered to be the causative agent of the mass mortality. The goal of the present work is to examine the characteristic features of the parasite by identifying the 18S rDNA sequences of the parasite. The experiments conducted include amplification of presumptive 18S rDNA from diseased tunicate tissues with UNonMet-PCR and sequencing the product. A preliminary phylogenetic analysis was performed on the presumptive parasite rDNA. A digoxigenin labeled DNA probe was designed on the basis of the sequences of rDNA. Dig-ISH assay was conducted to diagnose the protistan parasite. A PCR using UNonMet-PCR primer generated 595 bp SSU rDNA fragment. Subsequently, PCRs with primer pair expended this sequence to 1542 bp. This is the first partial sequences of SSU rDNA gene to be published on the protistan parasite that has presumed causing the mass mortality of tunicate. Since the Dig-ISH technique demonstrated the presence of infection in hemocytes on the all host tissues, the fragment was confirmed to be the intracellular protistan parasite SSU rDNA. A phylogenetic analysis suggested that the protistan parasite may be a unique eukaryote that is closely related to Apicomplexa.
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