Helicobacter pylori와 대장균의 Shuttle Vector 개발 = Construction of a Shuttle Vector of Helicobacter pylori and Escherichia coli
저자
조명제 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 이우곤 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 이상룡 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 김경희 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 안영숙 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 김성희 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 김현주 (경상대학교 의과대학 병리학교실) ; 류복덕 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 최여정 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 윤영혜 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 백승철 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 전영석 (경상대학교 의과대학 미생물학교실) ; 이광호 (경상대학교 의과대학 미생물학교실)
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1997
작성언어
Korean
주제어
KDC
476.05
자료형태
학술저널
수록면
18-25(8쪽)
제공처
In this study, a vehicle vector using cryptic plasmids was constructed for gene transfer in Helicobacter pylori. pHP51(3.9 kb) and pHP489(1.2 kb) were selected for constructing vectors from cryptic plasmid of H. pylori isolates in Korea. The HindⅢ-digestedDNA fragment(1.2kb) of pHP489 and 1.6kb DNA fragment of pHP51 were ligated with a kanamycin resistance gene(aph3'-Ⅲ) from C. jejuni to produce the recombinant plasmids pHP489K and pHP51K, respectively. Transformation frequency of pHP51K by electroporation was low. But pHP489K could be effectively transformed into various H. pylori strains. In order to design an intermdiate vehicle vector for gene transfer into H. pylori, pBlueHP489K was prepared by recloning pHP489K DNA into pBluescript and pTZ19R vector. This vector permitted the DNA fragment containing pHP489 sequence, aph3'-Ⅲ, and cloned DNA to be cut and self-ligated in the SacⅠ site after cloning. ureA and ureB gene were inserted into pBlueHP489K, resulting in pBlueHP489K/AB. The DNA fragment containing pHP489, kanamycin resistance gene(aph3'-Ⅲ), and urease structural gene was cut away from pBlueHP489K/AB and self-ligated to generate pBlueHP489K/AB. pBlueHP489K/AB made urease-negative H. pylori strains restore their urease activity. By this experiment, pBlueHP489K was confirmed to be the vehicle system for transferring H. pylori genes.
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