KCI등재
미립자 응집반응을 이용한 C-reactive Protein의 면역측정법에 관한 연구 = Microparticle-based Immunoassay for the Detection of C-reactive Protein in Serum
저자
김재화(Jae-Wha Kim) ; 송은영(Eun-Young Song) ; 이희구(Hee-Gu Lee) ; 최용경(Yong-Kyung Choe) ; 최명자(Myung-Ja Choi) ; 김용호(Yong Ho Kim) ; 최인성(In-Seong Choe) ; 정태화(Tai-Wha Chung)
발행기관
대한의생명과학회(The Korean Society For Biomedical Laboratory Sciences)
학술지명
권호사항
발행연도
1996
작성언어
Korean
주제어
KDC
510
등재정보
KCI등재
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
41-48(8쪽)
제공처
환자의 복수와 늑막액으로부터 p-diazonium phenylphosphorylcholine(DPPC) coupled Separose-4B affinity chromatography와 hydroxylapatite chromatography를 실시하여 C-reactive protein(CRP)를 분리, 제정하였다. 정제된 CRP를 토끼에게 면역화하여 항혈청을 얻고 affinity chromatography를 하여 면역항체(IgG)를 분리하였다. 분리된 면역항체를 미립자에 감작시킨 후 미립자 응집반응에 의하여 3분내에 CRP를 측정할 수 있는 간이 면역측정법을 개발하였다. 본 연구에서 개발된 CRP측정법의 검출범위는 0.5~20㎎/dl이며, 임상 시험 결과 0.7~2.9㎎/dl에서는 강한 응집반응을, 5.0~13.2㎎/dl에서는 약한 응집반응을 보였고 28㎎/dl이상에서는 항원 과잉으로 인한(zone of Ag excess phenomenon) 위음성을 나타냈다. 74명의 환자 혈청을 대상으로 CRP의 농도를 조사한 결과 평균치는 3.8㎎/dl이었으며 대부분의 환자에서는 10㎎/dl 이하의 농도로 존재하였다. 그러므로 1차판정시 음성을 나타낸 시료라도 혈청을 5~10배정도 희석하여 재분석한다면 오차없이 CRP를 검출할 수 있었다. 환자 혈청을 검체로 하여 본 연구에서 개발한 면역측정법과 현재 수입 시판중인 프랑스의 B사 제품과 일본의 I사 제품을 비교한 결과 좋은 상관관계를 보였다. 이와 같은 평가분석을 통하여 볼 때 본 연구에서 개발한 간이 면역측정법은 사용이 비교적 간편하며 신빙성이 있어 CRP를 스크리닝 하는데 효과적임을 알 수 있었다.
더보기The C-reactive protein(CRP) from ascitic and pleural fluid was purified using calcium dependent affinity chromatography of CNBr activated Sepharose-4B covalently coupled to p-diazonium phenylphosphorylcholine(DPPC) and hydroxylapitite chromatography. Polyclonal antibody was prepared from rabbit by immunizing the purified CRP. Specific immunoglobulin G was isolated using affinity chromatography and coupled to microparticles. A sensitive microparticle-based immunoassay was developed to measure CRP within 3 mins. The detection range was between 0.5㎎/dl and 20㎎/dl in serum, showing strong response in the range of 0.7~2.9 ㎎/dl, weak response in 5.0~13.2 ㎎/dl and zone phenomenon over 28㎎/dl. The average value of CRP in 74 samples was 3.8㎎/dl and most of the values were lower than 10㎎/dl. The CRP values of serum samples were determined by our microparticle-based immunoassay, and were compared with those obtained using the other commercial products(B Co., France and I Co., Japan). Good correlations were shown between the values obtained by our developed mi-croparticle-based immunoassay system and those by other commercial products. All performance characteristics evaluated make our developed microparticles-based immunoassay suitable for a simple, rapid, and reliable screening of CRP in serum.
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