Effect of the Extract Methods of Gourd Seeds on Detection of Cucumber Green Mottle Mosaic Virus by Enzyme-linked Immunosorbent Assay = 박과종자의 추출방법에 따른 ELISA의 CGMMV 검출 효과
저자
Chun, Se-Chul (건국대학교 생명환경과학대학 식량자원학과) ; Lee, Keumhee (농림부 국립식물검역소) ; Song, Y. S. (농림부 국립식물검역소) ; Ko, K. I. (농림부 국립식물검역소) ; Kim, B. K. (농림부 국립식물검역소)
발행기관
建國大學校附設農業資源開發硏究所(The Research Institute of Agricultural Resources Development Kon-KuK University)
학술지명
권호사항
발행연도
2002
작성언어
English
주제어
KDC
520.5
자료형태
학술저널
수록면
11-15(5쪽)
제공처
박과 종자로부터 효율적인 오이녹반모자이크 바이러스(CGMMV) 추출방법을 ELISA에 의하여 조사 비교하였다. 종자를 30분에서 48시간 바이러스 추출 완충 용액에 침지하여 추출한 방법, 2시간 침지 후 2시간 냉동시키고 해동하여 10시간 동안 방치하여 추출한 방법을, 종자를 분쇄하여 추출하는 방법과 비교 평가하였다. 14시간 침지에 의한 추출과, 2시간 침지 후 2시간 냉동, 10 해동 방치 추출한 것은 분쇄법에 의한 추출법과 ELISA의 CGMMV 검출 효율이 유사하였다. 따라서, 노동이 많이 소요되는 분쇄법 대신에 14시간 침지 누출이나, 2시간 침지 후 2시간 냉동, 10시간 해동 방치하는 추출법을 사용할 수 있을 것임을 제시하여 주었다. 또한, 마이크로플레이트의 한 well 당 종자의 양을 1개보다는 10, 20개 사용하는 것이 검출효율이 유사하였다. 이는 총 사용되는 종자의 양이 일정하다고 할지라도, well 당 사용되는 종자가 20개일 경우까지는 well 당 사용되는 종자를 수를 증가시키더라도 바이러스를 검출할 효율은 동일함을 제시하여 주었다.
Efficient methods of virus extraction from gourd seeds for the detection of enzyme-linked immnosorbent assay (ELISA) were compared. Seeds were soaked in sample extraction buffer (Agdia, Inc., Elkhart, IN USA) for 30min∼48hrs to exude cucumber green mottle mosaic virus. In addition, 2 hr soaking in sample extraction buffer and 2 hr of freezing followed by 10 hr thawing extract (2S-2F-10T) was used for the detection of the virus by ELISA. Whole seed and seed coat only were extracted for the detection of cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV) by ELISA. Also, the effect of amount of seeds on the rate of detection of the virus by ELISA was studied. Soaking seeds for 14hr and 2S-2F-10T methods were similar to seed and only seed coat crushing methods on the efficiency of virus detection, indicating that seed soaking methods for the extraction could be used instead of mechanical breaking seeds with similar detection rate of the virus from gourd seeds. The results suggested that the chance of detection for the virus by increasing amount of seeds up to 20 seeds per well culd be same to one seed per well, although total amount of seeds for detection of the virus would be same for one seed and 20 seeds per well.
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