Inhibition of the Plasma Membrane ATPase of Saccharomyces cerevisiae by Diethylstilbestrol and N,N'-Dicyclohexylcarbodiimide = Diethylstilbestrol과 N,N'dicyclohexylcarbodiimide에 의한 Saccharomyces cerevisiae 세포막 ATPase의 저해

국문 초록 (Abstract)

소수성 저해제인 diethylstilbestrol(DES)과 N,N'-dicyclohexylcarbodiimide(DCCD)에 의하여 S.cerevisiae KCTC 1205의 세포막 ATPase가 저해되는 현상에 대하여 조사하였다. DES는 $K_{EI}/K_{ESI}$의 비율이 0.43-1.57의 값을 보임으로써 비경쟁적 저해에 매우 근사한 저해 Kinetics를 보였다. 이는 DES와 기질인 MgATP의 결합부위가 서로 다를 가능성을 시사하였다. 그러나 본 실험의 결과로는 DES가 세포막지질에 작용함으로써 효소역가에 간접적이고 비특이적으로 작용할 가능성을 배제할 수 없었다. DCCD에 의한 저해의 경우, 반응치수가 0.79로 산출되어 DCCD에 대하여 거의 1차 반응을 따르는 것으로 나타났다. 이로써 세포막 ATPase의 저해는 한 분자의 DCCD가 효소의 단일부위와 반응함으로써 일어남이 시사되었다. 이 반응에 대한 2차 반응속도상수는 $7.4{\pm}1.3sec^{-1}{\cdot}M^{-1}$로 산출되었다. 저해에 대한 pH의 영향은, DES의 경우 4.0-6.5의 범위에서 별 영향이 없었으며 DCCD의 경우는 4.0-9.0의 범위에서 전체적으로 낮은 pH로 갈수록 저해가 증가하였다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

The inhibition of the plasma membrane-bound ATPase of S. cerevisiae KCTC1205 was studied for two hydrophobic inhibitors, diethylstilbestrol (DES) and N,N'-dicyclohexylcarbodiimide (DCCD). DES showed nearly noncompetitive inhibition kinetics ($K_{EI}/K_{ESI}$=0.43-1.57), which suggested non-overlapping binding sites for MgATP and DES. For the present, however, indirect and nonspecific action of DES through membrane lipid can not be excluded. For DCCD inhibition, near first-order reaction kinetics(n=0.79 with respect to DCCD) was observed. This suggested an inhibition resulting from the reaction of a single molecule of DCCD with a single site on ATPase. For the covalent inactivation reaction, a second-order rate constant of $7.4{\pm}1.3sec^{-1}M^{-1}$ was calculated. For DES there were only minor effects of pH on the inhibition, while higher reactivities were observed for DCCD at acidic pH's in the range of 4 to 7.