구연발표 : 세침흡입 검체를 이용한 분자진단의 적용 = Molecular diagnostic cytopathology
저자
발행기관
학술지명
조직세포검사학회 발표자료집(The Korean Society for Histology & Cytology Laboratory)
권호사항
발행연도
2008
작성언어
Korean
자료형태
학술저널
수록면
19-20(2쪽)
제공처
중단사유
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배경: 분자진단은 감염성 질병진단, 암의 진행 및 진단, 질병 치료약제 처리 결정에 대한 지식과 분자생물학적 기술의 적용으로 진행되며 조직절편이나 세포검체에 RNA 또는 DNA probe를 사용하거나 핵산 추출을 통해 이루어지는 모든 검사를 포함한다. 분자진단은 감염성질병(infection disease), 유전적 질병(inherited disease), 고형암(solid tumor), 혈액종양(haemato-oncology) 진단 등의 네 가지로 구성된다. 분자진단이 유전적 질병의 진단에 보편적으로 이용이 되는 동안 고형암(solid tumor)에 관련된 진단에 세포, 조직 검체를 이용한 분자진단의 적용 필요성에 대해 조직진단 전문가(histopathologists)나 세포진단 전문가(cytopathologists)들 사이에서 의견들이 분분하고 관심도가 증가되고 있는 것을 확인할 수 있다. 세포진단이나 조직진단에 분자진단은 때때로 명확한 진단의 정립에 꼭 필요하고 일반적인 조직, 세포학적 진단에 암의 진행과 질병의 약제처리에 관련된 새로운 정보를 제공하며 세침흡입을 통해 얻은 조직 세포로부터 직접적인 질병의 원인 및 유전에 관련된 정보를 제공해 준다. 또한, 병리검체는 종종 분자병리진단에 매우 유용한 재료이며 조직, 세포학적 검사의 불일치 진단 보완을 위한 보조적인 진단법으로 이용되어지고 있다. 최근 병리검사에서는 실제로 세포검체를 이용하여 암의 진단 및 혈액 종양의 진단에 분자 검사를 적용하려는 노력과 함께 ‘molecular diagnostic cytopathology``라는 정의 하에 조기 진단 및 치료 정보를 분자 진단의 적용으로 제공하려 시도하고 있다. 하지만 조기 진단에 이용되는 세침흡입법을 이용한 검체인 세포와 조직 검체는 검체 채취가 쉽고 용이하며 빠른 결과를 제공할 수 있는 장점이 있지만 표본의 양이 적어 분자진단(diagnosis of molecular)에 어려움이 많다. 본 연구는 핵산 추출법의 개선과 cell dissection 기술의 적용을 통해 체액 및 세침흡입법으로 채취한 검체에 돌연변이 분자병리검사를 적용하여 면역검사등과 함께 종양의 유형과 침습 정도 확인 등의 빠르고 정확한 결과를 제공하려 한다. 방법: 2007년 부터 2008년 8월 동안 건국대학교병원에 방문한 환자에서 채취한 체액 및 세침흡입법으로 얻은 검체를 이용하였다 핵산은 원하는 세포만을 현미경하에서 바늘(26gage)로 dissection 방법으로 채취하여 추출하였고 핵산증폭(PCR)은 EGFR, K-ras, B-RAF 유전자 돌연변이검사를 위한 위치를 증폭 시킨 후 pyrosequencer를 이용한 돌연변이 존재 여부를 확인하였다. 결과: EGFR 돌연변이 검사 총 160건에서 세침흡입법을 이용한 검체는 17건(10.6%), 체액은 13건(8.1%), tissue biopsy 은 123건(76.9%)을 진행하였고 총 28.1%에서 돌연변이가 나타났고 세포 검체에서는 46.7%, 조직검체 에서는 25.2% 의 돌연변이를 확인 할 수 있었다. K-ras 돌연변이 검사는 총 122건 중 세침흡입법을 이용한 검체는 9건(7.4%), 체액은 12건(9.8%), tissue biopsy 은 98건(80.3%)을 진행하였고 총 8.2%에서 돌연변이가 나타났고 세포 검체에서는 12.5%, 조직검체 에서는 7.1% 의 돌연변이를 확인 할 수 있었다. B-RAF 돌연변이 검사는 총 521 건으로 세침흡입법을 이용한 검체는 452건(86.8%), 수술 조직 검체는 68건(13.1%)을 진행하였고 총 19.2%의 돌연 변이를 확인 할 수 있었고 갑상선암 진단에서 세포 진단에서 Atypical 인 경우 39.0%의 돌연변이가 나타났고 불확실진단(indeterminate)에서는 25%에서 돌연 변이가 나타났다. 고찰: 폐암 환자의 항암치료제를 결정짓는 EGFR 과 K-ras 돌연변이 검사시 수술 후 조직을 이용하기 보다는 수술 이전에 세침흡입법을 통해 얻은 검체로 조직 세포학적 진단과 더불어 분자병리검사를 시행하여 폐암 조기진단과 동시에 암 치료제의 신속한 결정으로 환자 조기 치료에 도움이 되고 있다. 그리고 갑상선 암(papillary thyroid carcinoma) 진단에 도움이 되는 B-RAF 돌연변이 검사에서는 세포 세침흡입 검체의 세포진단에서 Atypical 이나 indeterminate 진단처럼 부정확한 진단에 분자검사를 적용하여 정확한 진단결과를 환자에게 제공하여 수술 및 치료 결정에 도움이 되고 있다. 이는 적은 검체에서 핵산을 추출할 수 있는 핵산 추출법의 적용과 암세포 등의 원하는 세포만을 선택하여 채취 할 수 있는 dissection 기술의 적용으로 돌연변이 검출 확률을 높여 조직, 세포 검사 및 면역병리검사와 더불어 정확한 진단에 도움을 주고 빠른 치료방침을 환자에게 제공할 수 있는 계기가 될 수 있었다. 조직세포병리진단 분야에서 분자진단은 급속한 발전을 이루고 있고 많은 관심을 가지고 있는 만큼 새로운 검사법의 적용으로 더 정확한 진단의 직접적, 보조적 방법으로 접근이 필요할 때라고 사료된다.
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