Polymerase Chain Reaction에 의한 Lactobacillus casei 및 돌연변이 균주들의 비교 분석 = Analysis of Lactobacillus casei and Mutant Strains by Polymerase Chain Reaction

국문 초록 (Abstract)

PCR 반응에 따른 RAPD를 산업적으로 유용한 유산균주를 신속하고 정확하게 분리하기 위한 방법의 하나로 사용할 수 있는지 가능성을 조사하기 위하여 L. casei의 4개 strain과 이들의 돌연변이 균주 2 종류를 비교하였다. 또한 L. casei로부터 농도와 순도면에서 PCR template에 적합한 chromosomal DNA를 3시간만에 추출할 수 있는 방법을 확립하였다. RAPD를 위하여는 degenerated primer를 이용하였는데 PCR 결과로 볼 때 분석에 적합한 수와 크기의 random product들이 증폭되었다. 본 실험에 사용된 조건과 primer들은 L. casei의 대상 균주들과 돌연변이균주들을 정확하고 특이적으로 구별할 수 있었는데 경우에 따라서는 적절히 primer들을 혼합하여 사용할 때 더욱 확실한 구별이 가능하였다. 본 실험의 결과는 반복성이 매우 우수한 것으로 확인됨으로서 장차 산업적으로 유용한 L. casei 균주들을 신속, 정확하게 분리, 동정하는 데에 이용 가치가 높을 것으로 사료된다.

다국어 초록 (Multilingual Abstract)

To classify Lactobacillus casei strains on the basis of difference in their chromosomal DNA sequence, we have performed polymerase chain reactions on their chromosomal DNA by using random primers, and followed by analyzing randomly amplified polymorphic DNA fragments. We also developed a mini-preparative method to isolate PCR-grade chromosomal DNA from Lactobacillus casei strains within 3 hours. Based on RAPD patterns by polymerase chain reactions with degenerated random primers, 4 Lactobacillus casei strains and 2 mutant strains were successfully discriminated. Results were very sensitive, strain-specific and reproducible. It was also reliable. These results suggest that RAPD may be applied efficiently for the identification of several Lactobacillus casei strains.