방사선 조사가 Sarcoma 180 Ascites Tumor Cells의 Histone 생합성에 미치는 영향 = Effect of X-ray Irradiation on Histone Biosynthesis of Sarcoma 180 Ascites Tumor Cells
저자
이근배 ; 이희성 ; Lee, Keun-Bai ; Lee, Hi-Sung
발행기관
학술지명
권호사항
발행연도
1972
작성언어
Korean
자료형태
학술저널
수록면
69-83(15쪽)
제공처
저자들은 지난번에 Sarcoma 180 ascites tumor cells의 histone의 생합성, methyl 화, acetyl 화 및 phosphoryl 화 등을 관찰 보고한 바 있다. 이번에는 X-선 조사가 histone 및 DNA 합성에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 glycine-1-$^{14}C$ 및 $^{32}P$-orthophosphate를 마우스에 주사하고 실험군과 대조군을 비교 검토하였다. Sarcoma 180 ascites tumor cells를 이식하여 7~9일 된 마우스에 1250 roentgen 의 X-선을 조사하고, 대조군은 sham irradiate 하였다. 24시간 후 실험군 및 대조군의 마우스의 복강에 $10{\mu}Ci$의 glycine-1-$^{14}C$ 및 $20{\mu}Ci$의 $^{32}P$-orthophosphate를 각각 주사하고 4시간 후 tumor cells의 histone 및 DNA에서 이 표지화합물의 거동을 관찰하였다. Sarcoma 180 ascites tumor cells에서 DNA는 Ogur and Rosen의 방법으로 추출하고 각 실험군의 방사능을 계수 비교하였다. Histone은 Johns, Johns and Phillips 등의 방법으로 분리하여 f1, f2a1, f2a2, f2b 및 f3 분획을 얻었다. 각 실험군의 histone 분획들은 polyacrylamide disc gel 전기영동에 의하여 단일 단백질임을 확인하였으며, 각 분획들의 방사능을 계수 비교하였다. 대조군 및 실험군의 각 histone 분획의 amino 산의 조성은 amino acid analyzer로 분리하였고, 각 amino 산의 방사능을 계수하였다. 1. Sarcoma 180 ascites tumor cells에서 얻은 histone의 각 분획의 함량은 정상동물 즉 마우스간, 흰쥐 및 소의 흉션의 그것에 비하여 큰 차이를 나타낸다. 2. 방사선을 조사한 실험군에 있어서는 $^{14}C$-glycine의 histone에의 편입이 약 14% 감소된다. $^{14}C$-glycine의 편입은 f3 분획에 가장 높으며 f2b 분획에 가장 낮다. $^{14}C$-glycine의 histone에의 편입은 주사 4시간 후에 최고에 달한다. 3. $^{14}C$C-glycine이 histone의 glycine 분획에 편입되는 율은 방사선 조사군에 있어서 약 12% 저하한다. 4. 방사선 조사군에 있어서는 DNA에 연입되는 $^{32}P$의 율이 약 14% 저하한다. Histone 생합성과 DNA 대사와의 관련에 관하여 약간의 고찰을 행하였다.
더보기In the earlier works from this laboratory, biosynthesis, acetylation, methylation and phosphorylation of histone of transplantable ascites tumor cells have been studied. The present paper deals with the effects of X-ray irradiation on histone biosynthesis of Sarcoma 180 ascites tumor cells. The tumor-bearing mice were irradiated with a dose of 1250 roentgen prior to 24 hours double-labeling with $10\;{\mu}Ci$ of glycine-$^{14}C$ and $20\;{\mu}Ci$ of $^{32}P$-orthophosphate. Sham irradiated mice were used as control. Histones were prepared by Johns procedure and fractionated on polyacrylamide disc gel electrophoresis. The histones were hydrolyzed in acid and the digests were chromatographed on an amino acid analyzer. DNA was extracted according to the method of Ogur and Rosen. Radioactivity was counted in a liquid scintillation spectrometer. The time course changes in the incorporations of labeled compounds into histone and DNA have been followed. Results obtained were as follows; 1. Contents of histone fractions from Sarcoma 180 ascites tumor cells have been shown to markedly differ from normal tissues, i.e. mouse liver, rat and calf thymus. 2. X-ray irradiation hindered $^{14}C$-glycine incorporation into histone by 14 per cent. Uptake of $^{14}C$ was highest into f3 and was lowest into f2b among histone fractiones both in normal and irradiated mice. The incorporation of $^{14}C$-glycine into histone reached a maximum 4 hours after glycine administration. 3. Radioactivity of $^{14}C$-glycine was less distributed about 12 per cent in glycine fraction of histone hydrolysates from X-ray irradiated animal. 4. A decreased $^{32}P$-incorporation (about 14%) into DNA was observed in irradiated mice. Relationships between histone biosynthesis and DNA metabolism were also discussed.
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