KCI등재후보
Whole-genome DNA 프로브를 이용한 구강 Bacteroides 균종의 식별 = Whole-genomic DNA Probes for the Identification of Oral Bacteroides Species
저자
최세원 (서울대학교 치과대학 구강미생물학과 ) ; 이정숙 (서울대학교 치과대학 구강미생물학과 ) ; 최선진 (서울대학교 치과대학 구강미생물학과 ) ; 김각균 (서울대학교 치과대학 구강미생물학과 )
발행기관
학술지명
International Journal of Oral Biology(International Journal of Oral Biology)
권호사항
발행연도
1992
작성언어
Korean
주제어
KDC
515.000
등재정보
KCI등재후보
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
45-50(6쪽)
제공처
소장기관
The need for a rapid and sensitive microbiological assay has become necessary for both research and clinical diagnostic. This need has become clear as a result of extensive documentation linking specific bacterial species and periodontal destruction. DNA probe technology seems to be able to provide both a sensitive and specific assay and may be able to alleviate the concern for transport of fastidious microorganisms. We have been trying to establish the method of identifying the periodontopathic microorganisms by DNA probe. As the first step we tried to know if whole-genomic DNA probe could differentiate between bacterial species, using three different serotype-strains of both bacteroides gingivalis and bacteroides intermedius. Also we tested if there is any cross-hybridization between bacteroides spp· and Streptococcus spp. The experimental procedures were as follows: anaerobic culture of bacterial cells, preparation of whole-genomic DNA from bacteria and measurement of DNA concentration, immobilization of DNA onto a nitrocellulose filter using dot-blot apparatus after 2-fold serial dilution of DNA, radio-labelling of DNA with ^32P by random oligonucleotide-primed synthesis, which would serve as a DNA probe, blocking unbound nitrocellulose with 0.05×BLOTTO, hybridization of the filter with ^32P-labelled probe, and washing and detection of bound probe by autoradiography. The results were as follows. The whole-genomic DNA probe of B. gingivalis strain 381 (serotype a) was able to hybridize with all three serotypes a, b, and c) of the species. Also, the whole-genomic DNA probe of B. intermedius strain 9336 (serotype b) was able to hybridize with all three serotypes of the species. There was no detectable cross-hybridization between B. gingivalis and B. intermedius or bacteroides DNA probe with streptococcal DNA, within the range of DNA amount used in the experiment. The DNA probe was able to detect 3ng of homologous DNA in a dot. It seems likely that whole-genomic probe could be used for identification of Bacteroides spp, in the clinical samples using DNA probe, if a suitable method to lyse the cell on the filter is provided.
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