실험적 간암의 전암병변에 관한 면역 조직화학적 및 유세포 계측 연구 : C-ras, C-erb B2, Proliferating Cell Nuclear Antigen 및 C-myc의 변동 Expression of C-ras, C-erb B2, PCNA, and C-myc = Immunohistochemical and Flow Cytometric Study on Hepatocarcinogenesis induced by 2-Acetylaminofluorene in Rats
To investigate the role of oncogenes in the hepatocarcinogenesis, author had undertaken an experimental study of hepatic carcinogenesis induced in 50 rats by feeding 2-acetylaminofluorene(2-AAF) in diet. The animals were sacrificed at 2, 4, 6, 8, 12, 16, 27, and 36 weeks after 2-AAF administration, and each liver was immunostained with monoclonal antibodies for c-ras, c-erb B2, and proliferating cell nuclear antigen(PCNA), and analysed by flow cytometry for c-myc oncoprotein.
1.The control livers were negative for expression of c-ras, c-erb B2, and c-myc oncoprotein, and positive for PCNA in 0.2% of hepatic cells.
2.The oval cells were markedly proliferated at 4 weeks after 2-AAF administration. They eventually became differentialted into bile ductular cells and small hepatocytes.
3.The oval cells and small hepatocytes showed high positive rate for PCNA with strong reaction for c=ras, c-erb B2, and c-myc oncoprotein whereas bile ductular cells failed to react for c-ras and c-erb B2.
4.Most hepatocytes in regenerative nodules lost the expression for c-myc, c-ras, and c-erb B2, although the oncoproteins persisted in some hepatocytes in the nodules.
5.Hepatocellular carcinoma of trabecular type and undifferentiated carcinoma were induced by 36 weeks after 2-AAF administration. The undifferentiated carcinoma cells expressed both PCNA and c-erb B2 oncoprotein rather strongly.
Above results suggested that in the early phase of the experiment, c-ras, c-erb B2, and c-myc oncogenes were activated and stimulated to proliferation makes the oval cells to e transformed into malignant cells. However, the findings that most oval cells were differented into reversible cells in regenerating nodules suggested that overexpression of these oncogenes might not be sufficient to obtain irreversible phenotype of malignant cells. Also strong expression of oncoproteins and high PCNA positive rate in small hepatocytes and in a few cells of the hyperplastic nodules suggested that the pathway of the cancer might go through the development of oval cells to small hepatocytes to nodules and eventually to cancer. However, the results that most hepatocytes in the nodules lost oncoproteins and development of undifferentiated carcinoma in the absence of nodule formation suggested that the hepatocellular carcinoma arose from oval cells directly without a morphologic intermediate.
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