SCOPUS
KCI등재
SCIE
복막 중피세포에서 사 이토카인에 의해 유도된 혈관내피성장인자의 발현 = Cytokine - Induced Expression of Vascular Endothelial Growth Factor in Peritoneal Mesothelial Cells복막 중피세포에서 사 이토카인에 의해 유도된 혈관내피성장인자의 발현
저자
윤성로(Sung Ro Yun) ; 이명자(Myung Ja Lee) ; 양철우(Chul Woo Yang) ; 김용수(Yong Soo Kim) ; 장윤식(Yoon Sik Chang) ; 방병기(Byung Kee Bang)
발행기관
학술지명
Kidney Research and Clinical Practice(Kidney Research and Clinical Practice)
권호사항
발행연도
2002
작성언어
-KDC
500
등재정보
SCOPUS,KCI등재,SCIE
자료형태
학술저널
발행기관 URL
수록면
749-760(12쪽)
제공처
목 적 : 지속적 외래 복막투석 환자에서 복막염 발상시 혈관내피 성장인자의 투석 배액내 농도변화를 관찰하고 복막중피세포를 배양 후 IL-1α, TNFα 및 IFNγ로 자극하여 혈관내피 성장인자의 발현을 관찰하였다.
방 법 : 지속적 외래 복막투석환자 30명에서 복막염 발생시와 치료 후 투석 배액을 수집하고 배양된 복막 중피세포를 IL-1α 및 TNFα 단독으로 또는 IFNγ와 병합하여 자극한 후 배양액을 수집하였다. 투석 배액관 복막중피세포 배양액에서 혈관내피 성장인자의 농도는 ELISA 방법으로, 복막중피세포에서 혈관내피 성장인자의 mRNA 발현은 Northern blot 방법으로, 복막중피세포에서 IL-1α 및 TNFα 자극 후 NF_k B 활성도는 EMSA 방법으로 측정하였다.
결 과 : 투석 배액내 혈관내피 성장인자의 농도는 복막염이 치료된 후에 비해 (245±21pg/mL) 복막염 진단시 (456±45pg/mL) 유의하게 높았다. (p<0.0001). IL-1α 및 TNFα는 복막중피세포에서 혈과내피 성장인자의 생산을 24시간부터 72시간까지 증가시켰으며 INFγ를 병합 투여한 경우 더 현저하게 증가시켰다. INF_kB 억제제인 pyrrolidine dithiocarbarnate를 전처치한 경우 IL-1α 및 TNFα에의해 유도되는 혈관내피 성장인자의 생산은 완전히 차단되었다. Nntthern blot 결과 IL-1α 및 TNFα는 농도에 비례하여 혈관내피 성장인자의 mRNA 발현을 증가시켰으며 자극 4시간 후 가장 증가시켰다. IL-1α 및 TNFα는 복막중피세포에서 NF_k B 결합 활성도를 자극 15분 후부터 증가시켰으며 1시간에 활성도가 가장 증가하였고 활성도의 증가에는 NF_k B subunit 중 p65 subunit가 관여되었다.
결 론 : 복막중피세에서 IL-1α, TNFα 및 IFNγ의 자극에 의한 혈관내피 성장인자 발현의 증가는 복막투석환자에서 복막염 발생시 복막 투과성을 증가시키는 역할을 할 것으로 생각된다.
Background : The mechanism of increased peritoneal permeability during peritonitis has not been clearly determined. We studied the changes in vascular endothelial growth factor (VEGF) levels in dialysate effluents during CAPD peritonitis, and VEGF expression in cultured peritoneal mesothelial cells (MCs) stimulated with IL-1α ,TNF α, and IFNγ. Methods : In 30 CAPD patients with peritonitis, dialysate effluents were serially collected at the time of diagnosis of peritonitis and when the peritonitis was recovered. Primarily cultured MCs were incubated with IL-1α or TNFα alone or in combination with INFγ. VEGF level in dialysate effluent and MCs conditioned medium was measured by sandwich ELISA. VEGF mRNA expression was analyzed by Northern blotting. The activation of NF_K B in response to IL-lα or TNFα was measured by electrophoretic mobility shift assay (EMSA). Results : VEGF levels in dialysate effluent at the time of diagnosis of peritonitis were significantly higher (456±45 pg/mL) than those when the peritonitis was recovered (245±21 pg/mL)(p<0.00001). Both IL-1α and TNFα stimulated VEGF production in MCs, and the stimulation was significant from 24 hours to 72 hours. INFγ, in combination with IL-lα or TNFα, significantly amplified IL-lα- or TNFα- induced VEGF production. Pre-incubation of MCs with NF_K B inhibitor, pyrrolidine dithiocarbamate, totally blocked IL-lα- or TNFα induced VEGF production. Northern blot analysis revealed that IL-1α and TNFα stimulated VEGF mRNA expression in a dose dependent manner. The stimulation was peak at 4 hours. IL-1α and TNFα stimulated NF_K B binding activity in MCs as early as at 15 minutes, with a peak activity at 1 hour, and p65 subunit was supershifted. Conclusion : Our results suggest that increased expression of VEGF in peritoneal mesothelial cells stimulated with proinflammatory cytokines, IL-1α, TNFα, and IFNγ, plays a role in the increased peritoneal permeability during CAPD peritonitis.
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