成熟赤血球의 Evans´blue 吸收에 미치는 二價金屬이온의 影響에 關한 硏究 = A study on the Effect of Divalent Metallic Ions on the Uptake Evans' Blue in Matured Erythrocytes
Non-nucleated mature erythrocytes of human blood were stored at 4℃ in darkness for 4 hours. Upon the storage erythrocytes were separated by the fractional centrifugal method. The effect of divalent metallic ions on the percent of dye uptake rate of Evans' blue as a neutral salt of a organic dye in the presence of 580mM glucose was observed and the following results were obtained.
1. The dye uptake rate was found to be kinetically proportional in function of incubation period in the stored eryrocytes for 4 hours with the dye uptake of 42.2 percent for 120 minutes incubation.
2. The statistical analysis of this effect of the relationship between the incubation period and the percent dye uptake rate was found to be very highly significant (p<0.001).
3. The effect of magnesium ion (5 mM) on the percent dye uptake rate in function of incubation times was kinetically increased in human matured erythrocytes when compared to that of control group. At the end of 40 minutes of incubation the human matured erythrocytes treated with magnesium ion ( 5 mM) increased about 1.5 times more of 30.5 percent dye uptake than the control group of 20.3 percent dye uptake.
4. The effect of magnesium ion was slightly accelerated with the addition of 0.01 mM magnesium ion; between 0.05 mM and 10 mM of magnesium ions the influence of this divalent metallic ion was greatest.
5. The increase in the concentration of copper ion inhibited proportionally and remarkablly the percent dye uptake rate by human matured erythrocytes.
Fifty percent inhibitory concentration (1_50) of copper ion on the percent dye uptake rate by human matured erythrocytes was found to be 10.07 micromoles.
6. Also, the effect of ferrous ion (5 micromoles) on the percent dye uptake rate is human matured erythrocytes for 40 minutes incubation was found to be 21.4 percent inhibition and it inhibited that the effect of hematin (5 micormoles) on the percent dye uptake rate o Evans' blue by 65.6 percent points for 40 minutes incubation.
7. No effect was exerted on the percent dye uptake rate in human matured erythrocytes during the incubation periods by the addition of calciumion (5 mM) and manganese ion (tmicromoles).
8. The addition of lithium ion at the concentration of 5 micormoles to reactant mixture was effectively increased on the percent dye uptake rate of Evans' blue for a incubation of 40 minutes when compared to that control group (20.3%) to 43.9 percent.
In view of the above findings it is clear that the effect of magnesium ion and lithium ion, as divalent metallic ions, on the Evans' blue absorbed into non-nucleated erythrocytes is considered to accelerate this enhancing effect while it does not accelerate that of hematin and copper ion. However, the effects of calcium ion and manganese ion was ineffective on the percent dye uptake of Evans' blue by human matured erythrocytes.
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