안티에스트로젠이 MCF-7 사람 유방암 세포에서 분비하는 단백질 합성에 미치는 영향 = Effect of Antiestrogen on Secreted Protein Synthesis in MCF-7 Human Breast Cancer Cells
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1993
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Korean
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학술저널
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761-767(7쪽)
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Tamoxifen과 같은 안티에스트로젠은 에스트로젠 수용체를 다량 함유하는 MCF-7 사람 유방암 세포에 작용하여 선택적으로 분자량 37,000 단백질을 세포로부터 합성하여 분비시키고, 에스트로젠 수용체를 함유하지 않는 MDA-MB-231 사람 유방암 세포에서는 그 효과가 없다. 이러한 안티에스트로젠 작용은 에스트로젠을 병용 투여하면 감소한다. 새롭게 합성되는 단백질은 [$^{35}S$]methionine과 [$^{35}S$]cysteine 존재하에서 세포를 배양한 후 배지로 분비된 단백질을 전기 영동하여 자가방사기록법으로 조사한 결과 안티에스트로젠 6시간 투여로 분자량 37,000 단백질의 증가를 관찰할 수 있고 1~2일 투여로 그 효과가 최고 수준에 도달한다. 이 단백질은 $10^{-8}$M trans-hydroxytamoxifen, LY117018, $10^{-6}$M trans-tamoxifen에 의하여 최대로 합성되고, $10^{-6}$M cis-tamoxifen에 의해서는 합성되지 않으므로 안티에스트로젠 특이적인 작용에 의하여 합성됨을 알 수 있다. 대조군 세포에서 분자량 37,000 단백질의 양은 약한 에스트로젠인 phenol red에 의하여 감소되어 있고, phenol red 제외 배지에서 배양된 세포는 이 단백질이 다량 검출된다. 당단백질 합성 억제제인 tunicamycin과 endoglycosidase H를 처리하면 이 단백질의 합성이 저해되는 것으로부터 이 단백질은 당단백질임을 알 수 있다.
더보기Antiestrogen, such as tamoxifen, selectively increased the production of secreted protein of 37,000 molecular weight (Mr) in estrogen receptor positive human breast cancer MCF-7 cells but not in estrogen receptor negative MDA-MB-231 cells, and the production of this protein by antiestrogen was inhibited by concomitant estradiol treatment. Proteins were detected by [$^{35}S$]methionine and [$^{35}S$]cysteine labeling of the cells and analysis of proteins by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gels and autoradiography. Enhanced production of 37,000 Mr protein was observed within 6 h of antiestrogen treatment, with maximal synthesis seen at 1~2 days when this protein represents about 6% of the total radiolabeled secreted proteins. This protein was stimulated maximally by $10^{-8}$ M trans-hydroxytamoxifen or LY 117018 or $10^{-6}$ M tamoxifen, and its antiestrogen specificity was seen by the fact that transtamoxifen increased this protein, whereas cis-tamoxifen, an estrogen, does not. Interestingly, the basal level of synthesis of the 37,000 Mr protein was high in the absence of estrogen and was then stimulated only minimally by the addition of antiestrogen, suggesting that this protein was dearly produced as an estrogen antagonistic protein. Amino acid incorporation conducted in the presence of tunicamycin and endoglycosidase H indicated that this protein was glycoprotein. This protein might serve as an useful marker for anti estrogen action in MCF-7 human breast cancer cells.
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