배 경 : H.pylori는 위염, 위궤양 재발과 밀접한 관계를 갖고 있기 때문에 검사실적 진단은 정확하여야 한다. H. pylori의 세균배양이 가장 바람직하지만 시설이나 노력면에서 많은 어려움이 있다. 이에 저자는 H. pylori의 세균배양과 더불어 PCR 을 실시하여 PCR의 유용성을 판단코져 다음과 같은 실험을 실시 하였다.
방 법 : 위장 장애를 호소하여 위내시경과 생검을 실시한 247명의 병리조직소견에 따라 정상대조군(57명), 만성위염(131명), 활동성만성위염(19명), 만성궤양(8명), 위암(32명) 으로 분류하였다. 세균배양은 brain heart infusion egg yolk agar선택배지를 사용하였고 PCR은 usease A gene sequence 를 증폭할수 있는 primer 2쌍을 선택하여 nested PCR 을 실시하였다.
결 과 : 세균배양에 의한 H. pylori의 검출율은 100명(40%) 였으며, PCR 에 의한 H.pylori의 검출율은 179명(72%) 으로 PCR 법이 세균배양법보다 검출율이 높았다(P:<0.05, Chi-square test, SPSS, ver7.0, USA). 세균배양과 PCR 모두 음성이 68명, 모두양성이 100명, 세균배양음성 PCR양성이 79명이였으며 PCR의 예민도는 0.1pg DNA(1 bacterial cell)였다. 일반세균을 이용한 특이도 검사에서 양성인 예는 없었다.
결 론 : 상기 결과로 미루어 보아 위생검조직에서 H.pylori의 검출은 연구자들이 사용한 PCR 법이 세균배양법보다 신속 정확하였다.
Background : Helicobacter pyloir has been implicated in the pathogenesis of active chronic gastritis and peptic ulcer disease in man. Thus, diagnosis and treatment of H. pylori infection are now of growing importance in ucle management. A variety of noninvasive and invasive methods have been described for the detection of H. pylori, but all of these techniques have disadvantages such as time consuming or insensitivity. So we describe the polymerase chain reaction(PCR) assay for the sensitive and specific detection of H. pylori.
Methods : Gastric biopsy specimens were obtained from 147 patients undergoing
endoscopic examinations at Hayang University Hospital. One half of the specimen was processed for routine culture and the other half for PCR. Bacterial genomic DNA from gastric biopsies are extracted by Instagene. Two sets of primer pairs derived from the nucleotide sequence of the urease A gene of H. pylori were used.
Result: H. pylori was cultured in 100(40%) cases and PCR assay deteted 179(72%) cases (P<0.05, Chi-square test, SPSS ver. 7.0, USA). Culture and PCR-positive cases totalled 100, and there were 68 cases negative by both mothods. There were 79 culture-negative and PCR-positive cases, but non that were culture-positive and PCR-negative. The assay was sensitive for as little as 0.1 pg of DNA (1 bacterial cell). The specificity of detection was confirmed by ensuring that the primers did not amplify DNA extract from other bacteria.
Conclusion: The PCR is rapid, accurate, and sensitive method for the detection of H. pylori.
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